猪肉中 3 种 β- 受体激动剂检测的固相萃取方法（Copure® MCX）

2019-08-01 09:20:07

逗点生物

简介：《GB/T 22286-2008 动物性食品中多种 β- 受体激动剂残留量的测定液相色谱串联质谱法》

一、样品提取

称取 2±0.01 g 经捣碎的猪肉样品，于 50 mL 离心管中，加 8 mL 乙酸钠缓冲液 (0.2 mol/L，pH=5.2)，充分混匀，再加50 μL β-葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶，混匀后，37 ℃水浴水解 12 h。振荡提取 15 min，4000 r/min 离心 10 min，取上清液 4 mL 于 50 mL 离心管中，并加入0.1 mol/L 高氯酸溶液 5 mL，混合均匀，用高氯酸调节pH 到 1±0.3。4000 r/min 离心 10 min 后将全部上清液转移到 50 mL 离心管中，用 10 mol/L 氢氧化钠溶液调节pH=11。加入 10 mL 饱和氯化钠和 10 mL 异丙醇 - 乙酸乙酯 (6:4, v/v) 混合溶液，充分提取 5 min，在 4000 r/min 离心 10 min。转移全部有机相，在 40 ℃水浴下氮吹干。加入 5 mL 乙酸钠缓冲液 (0.2 mol/L，pH=5.2)，超声混匀，使残渣充分溶解后备用。

二、SPE 柱净化

实验材料： Copure® MCX，60 mg/3 mL

(1) 活化：MCX 柱依次用 3 mL 甲醇和 3 mL 水活化。
(2) 上样和洗脱：取上述残渣溶液上柱，控制流速 0.5 mL/min。后依次用 2 mL 水、2 mL 2 % 甲酸水、2 mL 甲醇淋洗柱子并抽干，最后用 2 mL 5 % 氨化甲醇溶液洗脱柱子上的待测成分。
(3) 重新溶解：收集洗脱液，于 40 ℃氮气吹干，准确加入1.0 mL 0.1 %甲酸/水-甲醇(95:5, v/v)溶液溶解残余物，0.22 μm 滤膜过滤，供高效液相色谱测定。