酸奶中地美硝唑检测的固相萃取方法（Copure® MCX）
- 2019-08-01 15:41:56
- 逗点生物
一、样品提取
准确称取酸奶2.0 g于50 mL离心管中加入15 mL乙酸乙酯，漩涡摇匀 2 min，4000 r/min 离心 5 min，取上清液；重复提取一次，合并清液；40℃水浴旋蒸至近干。鸡心瓶加 0.1mol/L 盐酸 3 mL，涡动 1 min，充分溶解转移至 15 mL 离心管中；向鸡心瓶加 3 mL 正己烷，手摇一分钟，转移至同一离心管中；手摇离心管 20 次，4000 r/min 离心 5 min，弃去正己烷层。再加 0.1 mol/L 盐酸 3 mL，涡动 1 min，合两次盐酸溶液，加 3 mL 正己烷重复除脂一次，除尽正己烷层，备用。二、SPE 柱净化
实验材料： Copure® MCX，60 mg/3 mL
(1) 活化：MCX 柱使用前依次用 3 mL 甲醇活化、3 mL0.1 mol/L 盐酸平衡。(2) 上样和洗脱 : 在 MCX 固相萃取柱上加入盐酸提取备用液，弃去流出液；依次用 2 mL 0.1 mol/L 盐酸、2 mL 甲醇淋洗，弃去淋洗液；抽干小柱；用 6 mL 甲醇 -10 % 氨水溶液（6:4, v/v）洗脱，收集洗脱液（整个上样、洗脱过程保持流速 1 mL/min）。
(3) 重新溶解：洗脱液于 40℃氮吹至 1 mL 以下，用水定容至 1 mL，过 0.22 μm 滤膜，供 HPLC 上样测试。
三、仪器条件
设 备：Waters Alliance 2695色谱柱 ：Welch Ultimate XB-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm)
检测器 ：Waters 2487 紫外检测器
检测波长：319 nm
流动相：A：乙腈 B：水
洗脱方式：梯度洗脱，见表 1
表 1 梯度洗脱条件
流速：1.0 mL/min
进样体积：20 μL
四、实验结果
表 1 1.0 mg/kg 酸奶中地美硝唑的添加回收结果
图 1 添加水平为 1.0 mg/kg 酸奶中地美硝唑的液相色谱图
五、订购信息
