人参中的人参皂苷 Re 检测的固相萃取方法（Copure® C18）
- 2019-08-21 15:51:32
- 逗点生物
一、样品提取
准确称取人参粉末 0.2 g 于 2 mL 离心管中加入甲醇 1mL；涡旋 1 min 分散均匀 ; 超声 5 min，12000 r/min离心 5 min。取上清液，重复提取 5 次，混合上清液；40 ℃氮吹至干，4 mL 水超声溶解，备用。二、SPE 柱净化
实验材料： Copure® C18，500 mg/6 mL
(1) 活化：C18 固相萃取柱使用前用 5 mL 甲醇、5 mL 水活化。(2) 上样和洗脱：往固相萃取柱中加入提取备用液，弃去流出液；加入 5 mL 水淋洗，弃去淋洗液；抽干。5 mL15 % 乙腈水溶液洗脱，收集洗脱液。（整个上样淋洗洗脱过程中流速保持 1 mL/min）
(3) 上机测试：洗脱液取 1 mL，0.22 μm 滤膜过滤，供HPLC 上样测试。
三、仪器条件
设备：Waters Alliance 2695色谱柱：Welch Ultimate XB-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm)
检测器：Waters 2487 紫外检测器
检测波长：203 nm
流动相：A：乙腈 B：0.025 mol/L 磷酸二氢钾溶液
洗脱方式：梯度洗脱
表 1 梯度洗脱条件
流速：1.0 mL/min
进样体积：20 μL
四、实验结果
表 1 2.0 mg/g 人参基质中人参皂苷 Re 的添加回收结果
图 1 添加水平为 2.0 mg/g 人参中人参皂苷 Re 检测的液相色谱图
五、订购信息
