黄连中盐酸小檗碱的固相萃取方法（Copure® HLB）
- 2019-08-21 16:06:29
- 逗点生物
一、样品提取
准确称取黄连 0.5 g，加入 25 mL 水，加热煮沸 10 min（防止烧干），冷却至室温过滤；再 25 mL 水淋洗提取物，最后定容至 50 mL；取 5 mL 用水稀释至 50 mL，取 5 mL 备用。二、SPE 柱净化
实验材料： Copure® HLB，60 mg/3 mL
(1) 活化：HLB 固相萃取柱使用前依次用 3 mL 甲醇、3 mL水活化。(2) 上样和洗脱：往固相萃取柱中加入备用提取液，弃去流出液；加入 3 mL 15 % 甲醇水溶液淋洗，弃去淋洗液，抽干小柱；再用 3 mL 甲醇溶液洗脱，收集洗脱液（整个上样、洗脱过程流速控制在 1 mL/min 内）。
(3) 重新溶解：洗脱液于 50 ℃下氮吹至近干，用甲醇定容至 1 mL，涡旋 1 min，过滤供 HPLC 测试。
三、仪器条件
设备：Waters Alliance 2695色谱柱：InertSustain-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm)
检测器：Waters 2487 紫外检测器
检测波长：298 nm
梯度洗脱：A：甲醇 B：0.1 % 甲酸水
表 1 梯度洗脱条件
流速：1.0 mL/min
进样体积：20 μL
四、实验结果
表 2 20.0 mg/kg 黄连中盐酸小檗碱的添加回收结果
图 1 添加水平为 20.0 mg/kg 黄连中盐酸小檗碱检测的液相色谱图
五、订购信息
