豆芽中 4 种植物生长素的 UPLC/ MS/MS 测定(QuEChERS)

2022-07-12 14:46:34
逗点生物
简介

一、样品提取

准确称取10.0 g 经粉碎的豆芽置于50 mL 离心管中,加入20 mL 含1% 甲酸乙腈溶液,2500 rpm 涡旋混匀5 min;然后加入QuEChERS 萃取盐包(4 g 无水硫酸镁和1 g 无水醋酸钠),立即手动振摇30 s,涡旋2 min;再以5000 r/ min 离心5 min,使乙腈和水分层,上层乙腈层待净化。

二、样品净化

精密量取上层乙腈层5 mL 置于QuEChERS 15 mL 净化管(300 mg 无水硫酸镁、100 mg C18) 中,2500 rpm 涡旋混匀2 min,以5000 r/min 离心5 min,移取上层清液4 mL 于另一15 mL 离心管中,45℃水浴氮吹至干,用甲醇定容至1 mL,过0.22 µm 尼龙滤膜供上机测试。


三、标曲配制 

称取空白豆芽样品 10.0 g 按照上述一、二步骤操作,作为 空白基质提取液; 分别精密量取一定量的混合标准液加入到空白基质提取液 中,用甲醇定容至 1 mL,配制成适当浓度的基质混合标准 工作溶液。 


四、仪器条件 

色谱条件 仪器:UPLC-MS/MS(Thermo Fisher TQS Endura) 色谱柱:CommaSil® ODS (2.1 mm×50 mm, 1.8 µm) 流动相:A:5 mmol/L 乙酸铵 B:甲醇(0.1% 甲酸) 


洗脱方式:梯度洗脱,见表 1 表 1 梯度洗脱程序

时间/min

A/%

B/%

0

95

5

2.0

70

30

3.5

10

90

4.0

10

90

4.1

95

5

5.0

95

5


流速:0.3 mL/min    柱温:35℃    进样量:5 µL


质谱条件

离子源:HESI                  电喷雾电压:3500 V 鞘气压力:35 arb             辅气压力:3 arb

离子传输管:380℃             辅气温度:420℃

表2 组分名称、保留时间及特征离子一览表(* 为定量离子)

名称

保留时间/min

母离子

子离子

赤霉素

3.22

344.9

133.0*,106.0

6- 苄基腺嘌呤

3.97

224.2

142.5*,238.9

4- 氯苯氧乙酸

3.45

184.8

161.0*,125.1

2,4- 二氯苯氧乙酸

3.86

218.9

126.7*,110.7


五、实验结果

表3 豆芽中4 种植物生长激素加标回收结果(25.0 µg/kg)



目标物

回收率(%)

平均回收率(%)

RSD

(%)

1

2

3

4

赤霉素

96.96

88.74

96.19

91.44

93.3

4.2

6- 苄基腺嘌呤

83.47

86.42

90.84

83.81

86.1

3.9

4- 氯苯氧乙酸

93.66

87.35

89.32

86.91

89.3

3.4

2,4- 二氯苯氧乙酸

78.48

77.82

78.50

75.41

77.6

1.9

豆芽中植物生长激素检测色谱图如下:



从上至下出峰顺序依次为:4- 氯苯氧乙酸、2,4- 二氯苯氧乙酸、6- 苄基腺嘌呤、赤霉素。

注意事项:

1. 该实验采用UPLC/MS/MS 检测,对部分目标物有基质抑制效应,如6- 苄基腺嘌呤,建议配制基质混合标准工作液进行定量,校正回收率。

2.在标准《BJS 201703》中,只取 4 mL 提取液进行净化, 离心后取全部净化液氮吹复溶,但在实际操作中,离心后实际氮吹复溶的净化液体积不到4 mL,会造成检测结果偏低,建议取5 mL 提取液净化,再精密量取 4 mL 净化液氮吹复溶。




订购信息


描述

包装

COQ050025H

4 g 硫酸镁、1 g 无水醋酸钠,50 mL 离心管

50支/盒 

COQ015014H

300 mg 硫酸镁、100 mg C18,15 mL 离心管

50支/盒 

CS215018ODS

CommaSil® ODS 色谱柱,2.1 mm×50 mm,1.8 µm

1根/盒 

BC-1000

biocomma® 多管涡旋混匀仪

1台/箱 

SF130-22-NL

尼龙 /Φ13 mm/0.22 µm/ 有机系

100个/盒 

MF047-22-MCE

MCE/Φ47 mm/0.45 µm/ 水系

200片/盒 

MF047-22-NL

NL 滤膜,直径 47 mm,孔径 0.22 µm,水系

200片/盒 

SC2-5

2 mL 蓝色聚丙烯盖,预开口,9-425

100个/盒 

V2-AL

2 mL 螺纹棕色样品瓶,带书写处 11.6*32 mm,9-425

100个/盒