血浆中水溶性维生素含量的分析 (Copure® PPT)

1）Copure® 96 孔PPT 蛋白沉淀过滤板2）biocomma® 多功能混匀仪3）biocomma® 96 孔正压提取装置4）biocomma® 96 孔氮吹仪5）biocomma® 热封膜仪

仪器：Thermo Scientific TSQ Endura

色谱柱：CommaSil® C18 (2.1mm×50 mm, 1.8 µm) 柱温：40℃

进样量：5 µL

流动相：A：水（含 0.1%FA）

B：甲醇（含 0.1%FA）洗脱方式：梯度洗脱

表1 流动相梯度洗脱条件

电喷雾电压：3500 V 鞘气压力：30 arb

辅气压力：10 arb 离子传输管：350℃

辅气温度：320℃ 采集方式：多反应监测

表2 各组分母离子和子离子检测的离子对参数

1、样本提取：

移取300 µL 甲醇于PPT 的孔中，再加入100 µL 血浆。用热封膜仪封膜后，1800 rpm 涡旋5 min。

2、获取滤液：

将PPT 与接收板置于正压提取装置中，调节压力，使滤液的流速保持1-2 秒/ 滴，收集滤液。

3、氮吹复溶：

移取200 µL 滤液至另一块接收板中氮气吹干后，每孔加入 75 µL 超纯水。用热封膜仪封膜后，1800 rpm 涡旋5 min。

4、上机检测：

将复溶液注入LC-MS/MS 系统中进行检测。

备注：① 沉淀剂中包含内标工作液，浓度和体积可根据

实验室的方法进行适当调整。

② 标准曲线的前处理方法与样本相同。

表3 加标回收率结果

从表3 的加标回收率可以看出，在4 种加标浓度下，6 种目标化合物都有较好的回收率。

表4 稳定性对比结果

从表4 的稳定性结果可以看出，与两种竞品对比，用Copure® PPT 做前处理的6 种目标化合物都有较好的稳定性，可以保证实验过程的良好重复。

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