血清中肌酐含量的分析 (Copure® PPT)
- 2022-07-12 16:37:35
- 逗点生物
一、设备和材料
1）Copure® 96 孔PPT 蛋白沉淀过滤板2）biocomma® 多功能混匀仪3）biocomma® 96 孔正压提取装置4）biocomma® 热封膜仪
二、仪器条件
仪器：Thermo Scientific TSQ Endura
色谱柱：CommaSil® HILIC (2.1mm×100 mm, 3 µm) 柱温：35℃
进样量：3 µL
流动相：A：5mmol/L 乙酸铵
B：甲醇 洗脱方式：梯度洗脱
表1 流动相梯度洗脱条件
时间（min） |
流速（mL/min） |
%B |
Curve |
0 |
0.3 |
5 |
5 |
0.5 |
0.3 |
5 |
5 |
0.6 |
0.3 |
90 |
5 |
1.0 |
0.3 |
90 |
5 |
1.1 |
0.3 |
5 |
5 |
5.0 |
0.3 |
5 |
5 |
电喷雾电压：3500 V 鞘气压力：40 arb
辅气压力：2 arb 离子传输管：350℃ 辅气温度：320℃ 离子化方式：ESI+
采集方式：多反应监测
表2 各组分母离子和子离子检测的离子对参数表2 各组分母离子和子离子检测的离子对参数
Compound |
Precursor (m/z) |
Product (m/z) |
Collision Energy (V) |
RF Lens (V) |
肌酐 |
114 |
86.2 |
10.23 |
60 |
44.5* |
17.39 |
|||
肌酐-d3 |
117 |
47.4 |
17.66 |
63 |
89.2 |
10.23 |
三、实验步骤
取200 µL 甲醇于PPT 板的孔中，再分别加入50 µL 血清和20µL 内标于PPT 板的孔中，。用热封膜仪封膜后，1500 rpm 涡旋5 min.。将PPT 板与接收板置于正压提取装置中， 调节压力，使滤液的流速保持1-2 秒/ 滴，收集滤液，上
LC-MS/MS 系统中进行检测。
备注：标准曲线的前处理方法与样本相同。
四、实验结果
4.1 检测色谱图
4.1 回收率结果
表3 血清中肌酐加标回收率结果
加标浓度（µg/L） |
回收率（%，n=3） |
CV（%，n=3） |
1 |
84.5 |
7.39 |
20 |
101.6 |
0.45 |
80 |
92.1 |
4.96 |
从表3 可以看出，不同加标浓度下，肌酐回收率良好，在
80%-102% 之间。
订购信息
|
描述 |
包装 |
MPPT9601 |
Copure® 96 孔PPT 蛋白沉淀过滤板，1 mL/well |
1 块/ 盒 |
MPPT9602 |
Copure® 96 孔PPT 蛋白沉淀过滤板，2 mL/well |
1 块/ 盒 |
BCM2500 |
biocomma® 多功能混匀仪 |
1 台/ 箱 |
BCY9601 |
biocomma® 96 孔正压提取装置 |
1 台/ 箱 |
BCS9601 |
biocomma® 热封膜仪 |
1 台/ 箱 |
