血清中磷脂去除的分析（Copure® PRP）

1) Copure® 96 孔 PPT 蛋白沉淀过滤板

2）biocomma® 多功能混匀仪

3）Copure® PRP 磷脂去除柱

4）biocomma® 热封膜仪

仪器：Thermo Scientific TSQ Endura

色谱柱：CommaSil® AQ (2.1mm×100 mm, 1.9 µm)

柱温：35℃ 样品温度：10℃

进样量：5 µL 流动相：A：水（含 0.1% 甲酸） B：甲醇（含 0.1% 甲酸）

洗脱方式：梯度洗脱

表 1 流动相梯度洗脱条件

离子化方式：ESI+

电喷雾电压：3500 V

鞘气压力：40 arb

辅气压力：2 arb

离子传输管：350℃

辅气温度：320℃

采集方式：Precursor Ion Scan ( 子离子 184 m/z，母离子范围 184~1000 m/z)

1、样品提取

1）将 Copure® 96 孔 PPT 蛋白沉淀过滤板置于 96 孔收集板上，加入 400 µL 甲醇。

2）将 100 µL 血清样本分装加入到 96 孔蛋白沉淀过滤板各孔中。

3）将蛋白沉淀板上端各孔封膜后，置于多功能混匀仪上，调节转速到 2000 rpm，充分混合 2 min，然后静置 10 min，待蛋白沉淀完全。4）3000 rpm 离心 2 min，收集过滤液到 96 孔收集板中，待净化。

2、样品净化

1）活化：向 Copure® PRP 及各品牌去磷脂产品（规格均为 60 mg/1 mL）中加 2 mL 甲醇，弃去流出液。

2）净化：将样品的收集液加入到 PRP 板中，收集流出液。

表 2 不同品牌的磷脂去除产品对比效果

结论：经过UPLC-MS/MS检测分析，逗点生物磷脂去除产品与市面类似产品的磷脂去除效果相当，均可满足测试要求

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