奶茶中8种合成着色剂的含量测定（Copure®WAX）
- 2022-08-15 13:50:31
- 逗点生物
奶茶中8种合成着色剂的含量测定（Copure®WAX）
一、样品提取
称取2.0 g试样于50 mL离心管中，加入5 mL硫酸锌溶液（120 g/L），混匀后，乙醇氨水溶液25 mL，涡旋混合1 min，超声提取15 min，以8000 r/min离心5 min，取上清液于干净50 mL离心管中，再加入15 mL提取液重复提取1次，合并上清液，定容到50 mL（若浑浊再次离心），取10 mL上清液，在50℃下氮气浓缩至2 mL，再加入10 mL 5%甲醇水溶液，混匀后作为待净化液。
注：乙酸氨水溶液：乙醇700 mL，氨水4 mL，用水定容至1 L。
二、样品净化（Copure® WAX, 150 mg/6mL）
活化：依次用6mL甲醇和6mL水活化；
上样：将上述待净化液过柱，弃掉流出液；
淋洗：依次用5 mL水和5 mL甲醇淋洗，抽干小柱；
洗脱：8 mL 2%氨化甲醇溶液洗脱，收集洗脱液，于45 ℃氮吹仪浓缩至0.3 mL左右，加入0.02mmol/L乙酸铵溶液（pH=9.0）复溶至2mL，涡旋混匀，过PTFE滤膜，上机。
三、仪器条件
仪器：液相色谱仪，ThermoFisher U3000
色谱柱：Agilent ZORBAX SB-C18 (4.6 mm×250 mm，5 μm)
流动相：A：0.02mol/L乙酸铵溶液 B：甲醇
洗脱方式：梯度洗脱，见表1
流速：1.0 mL/min
柱温：30 ℃
进样量：10 μL
检测器：紫外检测器
检测器波长范围：400~800 nm，柠檬黄测定波长为415 nm；新红、苋菜红、胭脂红、日落黄、诱惑红、赤藓红测定波长为520 nm；亮蓝测定波长为630 nm。
表1 梯度洗脱程序
时间/min |
A/% |
B/% |
0.01 |
90 |
10 |
12.0 |
65 |
35 |
19.0 |
55 |
45 |
22.5 |
50 |
50 |
23.0 |
45 |
55 |
24.0 |
35 |
65 |
34.0 |
35 |
65 |
35.0 |
90 |
10 |
42.0 |
90 |
10 |
四、实验结果
（1）加标回收实验结果
表2 加标水平为5 mg/kg回收结果
目标物 |
回收率% |
平均回收率% |
|
1 |
2 |
||
柠檬黄 |
96.5 |
94.7 |
95.6 |
新红 |
97.4 |
101.3 |
99.4 |
苋菜红 |
94.1 |
95.3 |
94.7 |
胭脂红 |
101.6 |
98.7 |
100.2 |
日落黄 |
98.5 |
102.6 |
100.6 |
诱惑红 |
93.8 |
92.4 |
93.1 |
亮蓝 |
94.3 |
96.5 |
95.4 |
赤藓红 |
89.3 |
85.3 |
87.3 |
（2）奶茶中着色剂色谱图
图1奶茶添加水平（5.0 mg/kg）中8种着色剂色谱图
订购信息
货号 |
描述 |
包装 |
COPWAX6150 |
biocomma® Copure®WAX ,150mg/6mL |
30支/盒 |
SDC-3000-D |
biocomma® 多管涡旋混匀仪 |
1台/箱 |
BN24 |
biocomma® 智能水浴氮吹仪 |
1台/箱 |
SF130-22-PTFE |
PTFE针式过滤器，直径13 mm， 孔径0.22 μm，有机系 |
100个/盒 |
SC2-1 |
2 mL蓝色聚丙烯盖，白色PTFE/红色硅胶垫，9-425 |
100个/盒 |
V2-AL |
2 mL螺纹棕色样品瓶，带书写处11.6*32 mm，9-425 |
100个/盒 |
