蜂蜜中链霉素和双氢链霉素的测定（Copure® HLB）
- 2022-08-15 14:06:55
- 逗点生物
蜂蜜中链霉素和双氢链霉素的测定（Copure® HLB）
《BJS 202103蜂蜜中链霉素和双氢链霉素的测定》
一、样品提取
准确称取5 g试样于50 mL离心管中，加入10 mL 提取液（含2 %三氯乙酸的磷酸盐缓冲溶液），涡旋混匀1 min，超声提取10 min，再加入10 mL提取液并定容至25 mL，涡旋混匀1 min后超声提取5 min，在10000 r/min离心5 min，待净化。
二、 样品净化（Copure® HLB,60 mg/3mL ）
活化：依次用3 mL甲醇，3 mL水活化Copure® HLB固相萃取小柱；
上样：取5 mL待净化液至已活化好的固相萃取小柱；
淋洗：用2mL水淋洗固相萃取小柱两次，抽干小柱；
洗脱：用1 mL 甲酸-乙腈-水（2:10:88，v:v:v）溶液洗脱，收集洗脱液，用2 %氨化乙腈1 mL定容至2 mL，涡漩，过滤膜，上机测试。
三、标曲配制
选同类型空白样品，依次加入适量混合标准中间溶液，按照样品提取和净化的步骤进行操作，配制成上机浓度分别为2.5 ng/mL、5 ng/mL、10 ng/mL、20 ng/mL、50 ng/mL、100 ng/mL的标准曲线。
四、仪器条件（Thermo Fisher TSQ Endura）
液相部分：
色谱柱： Hilic (2.1 mm×100 mm,2.7 μm)
流动相：A：5 mmol/L乙酸铵溶液（含0.3 %甲酸） B：乙腈（含0.3 %甲酸）
流速：0.3 mL/min 柱温：35℃ 进样量：10 μL
洗脱程序：梯度洗脱表1
表1 梯度洗脱程序
时间/min |
A/% |
B/% |
0.0 |
10 |
90 |
0.5 |
10 |
90 |
2.5 |
90 |
10 |
4.0 |
90 |
10 |
4.1 |
10 |
90 |
5.0 |
10 |
90 |
质谱条件：
离子源：HESI 电喷雾电压：3500 V 鞘气压力：40 arb
辅气压力：10 arb 离子传输管：350 ℃ 辅气温度：375 ℃
表2 组分名称、保留时间及特征离子一览表（*为定量离子）
名称 |
母离子 |
子离子 |
链霉素 |
582.2 |
246.2，263.2* |
双氢链霉素 |
584.2 |
246.0，263.0* |
五、实验结果
5.1测试数据
表3 加标回收率结果
化合物 |
5.00 μg/kg |
10.0 μg/kg |
20.0 μg/kg |
|||
回收率% |
RSD%（n=3） |
回收率% |
RSD%（n=3） |
回收率% |
RSD%（n=3） |
|
链霉素 |
81.6 |
6.12 |
86.1 |
5.25 |
93.8 |
4.41 |
双氢链霉素 |
83.5 |
5.94 |
90.8 |
5.11 |
101 |
3.89 |
5.2测试色谱图
图1蜂蜜加标样品总离子流图（20.0 μg/kg）
订购信息
货号 |
描述 |
包装 |
COHLB360 |
Copure® HLB，60 mg/3mL |
50支/盒 |
SDC-3000-D |
biocomma®多管涡旋混匀仪 |
1台/箱 |
SF130-22-NL |
尼龙针式过滤器，直径13 mm，孔径0.22 μm，有机系 |
100个/盒 |
BN24 |
智能水浴氮吹仪 |
1台/箱 |
SC2-1 |
2 mL蓝色聚丙烯盖，白色PTFE/红色硅胶垫，9-425 |
100个/盒 |
V2-AL |
2 mL螺纹棕色样品瓶，带书写处11.6*32 mm，9-425 |
100个/盒 |
