蜂蜜中四环素类药物残留检测的固相萃取方法（Copure® HLB）

2019-07-31 15:55:32

逗点生物

简介：《GB/T 21317-2007 动物源性食品中四环素类药物残留量检测方法》

一、样品提取

称取混匀蜂蜜试样 5.00 g( 精确到 0.01 g)，置于 50 mL 离心管中，用 0.1 mol/L EDTA-Mcllvaine 缓冲液溶解并定容至 50 mL，涡旋混合 1 min，冰水浴超声 10 min，转移至50 mL 离心管中，冷却至 0 ℃ -4 ℃，5000 r/min 离心 10min( 温度低于 15 ℃ )，用滤纸过滤待净化。

二、SPE 柱净化

实验材料： Copure® HLB，60 mg/3 mL

(1) 活化：HLB 柱依次用 5 mL 甲醇和 5 mL 水活化。
(2) 上样和洗脱：准确吸取 10 mL 备用液以 1 滴 / 秒的速度过 HLB 固相萃取柱，待样液全部流出后，依次用 5 mL水和5 mL甲醇-水(5:95, v/v)淋洗，弃去全部流出液。2.0 kPa 以下减压抽干 5 min，最后用 10 mL 甲醇 - 乙酸乙酯溶液 (1:9, v/v) 洗脱，收集洗脱液。
(3) 重新溶解：洗脱液于 40 ℃氮气吹干，加 10 mmol/L 三氟乙酸水溶液 1.0 mL 溶解残余物，水系滤膜过滤，供高效液相色谱测定。

三、仪器条件

设备：Waters Alliance 2695
色谱柱：Welch Ultimate XB-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm)
检测器：Waters 2487 紫外检测器
检测波长：350 nm
流动相：A：乙腈 B：10 mmol/L 三氟乙酸水溶液
洗脱方式：梯度洗脱，见表 1
表 1 流动相梯度洗脱程序