牛奶中氢化可的松检测的固相萃取方法（Copure® Silica）
- 2019-08-01 15:36:34
- 逗点生物
一、样品提取
称取牛奶 5.0 g 于 50 mL 离心管中，加 30 mL 乙酸乙酯，均质 1 min，350 r/min 摇床振动 20 min，4200 r/min 离心 10 min，移取乙酸乙酯层。残渣中加乙酸乙酯 25 mL，均质 1 min，350 r/min 摇床振动 20 min，4200 r/min 离心 10 min，移取乙酸乙酯层。合并两次提取液，40 ℃旋转至近干，加乙酸乙酯 1 mL 和正己烷 5 mL 溶解残渣，待净化。二、SPE 柱净化
实验材料： Copure® Silica，500 mg/6 mL
(1) 活化：用 6 mL 正己烷活化 Silica 固相萃取柱。(2) 上样和洗脱：取待测液，通过 Silica 固相萃取小柱富集，弃去流出液。用 6 mL 正己烷淋洗固相萃取柱，真空抽干5 min，弃去流出液。用6 mL正己烷-丙酮溶液(6:4,v/v) 洗脱萃取柱，收集洗脱液。
(3) 重新溶解：洗脱液于 40 ℃氮气吹干，加 20 % 乙腈水溶液 2.0 mL 溶解残余物，过 0.22 μm 滤膜，供高效液相色谱测定。
三、仪器条件
设备：Waters Alliance 2695色谱柱：Welch Ultimate XB-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm)
检测器：Waters 2487 紫外检测器
检测波长：254 nm
流动相：A：乙腈 B：0.1 % 甲酸水溶液
洗脱方式：梯度洗脱，见表 1
表 1 梯度洗脱条件
流速：1.0 mL/min
进样体积：20 μL
四、实验结果
表 2 添加水平为 1.0 mg/kg 牛奶中氢化可的松的添加回收结果
图 1 添加水平为 1.0 mg/kg 牛奶中氢化可的松检测色谱图
五、订购信息
