沐浴露中氢化可的松检测的固相萃取方法（Copure® HLB）
- 2019-08-09 17:03:42
- 逗点生物
一、样品提取
准确称取沐浴露 0.20 g( 精确到 0.01 g) 于 10 mL 具塞塑料离心管中，加入 3 mL 饱和的氯化钠溶液，涡旋振荡1 min 使样品分散，准确加入 2 mL 乙腈，充分涡旋提取2 min，5000 r/min 离心 10 min，吸出上层清液于另一50 mL 具塞塑料离心管中，下层氯化钠溶液用 2 mL 乙腈重复提取步骤一次，合并二次乙腈提取液，往提取液中准确加入 40 mL 高纯水，混匀，加入 10 % 亚铁氰化钾水溶液 0.2 mL，混匀，加入 20 % 乙酸锌水溶液 0.2 mL 混匀，5000 r/min 离心 10 min，上清液待净化。二、SPE 柱净化
实验材料：Copure® HLB，60 mg/3 mL
(1) 活化：HLB 固相萃取柱使用前依次使用 5 mL 甲醇和10 mL 水活化。(2) 上样和洗脱：将待净化液的样品溶液加入已活化好的固相萃取柱中，以 1 mL/min 的流速过柱，弃去滤液。用5 mL 乙腈 - 水溶液 (10:90, v/v) 分两次淋洗固相萃取柱，弃去淋洗液，用吸耳球吹出小柱中残留液。用 4 mL 甲醇洗脱固相萃取柱，收集洗脱液。
(3) 重新溶解：洗脱液于 40 ℃氮吹吹干，用 2 mL 甲醇 -水溶液 (5:5, v/v) 定容，0.22 µm 微孔滤膜过滤，供 HPLC上机测试。
三、仪器条件
设备：Waters Alliance 2695色谱柱：Welch Ultimate XB-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 µm)
检测器：Waters 2487 紫外检测器
检测波长：254 nm
流动相：A：乙腈 B：0.1 % 甲酸水溶液
洗脱方式：梯度洗脱
表 1 梯度洗脱条件
流速：1.0 mL/min
进样体积：20 μL
四、实验结果
表 2 10.0 mg/kg 沐浴露中氢化可的松的添加回收结果
图 1 添加水平为 10.0 mg/kg 沐浴露中氢化可的松的液相色谱图
五、订购信息
