食品中丙酸检测的固相萃取方法（Copure^® HLB）

《GB 5009.120-2016食品中丙酸钠、丙酸钙的测定》

一、样品提取 

称取5.0 g样品于50 mL离心管中，加水20 mL，加入0.5 mL的1.0 mol/L磷酸溶液，涡旋混匀2 min,超声提取10 min,用1.0 mol/L磷酸溶液调pH为2.8~3.1，用水定容至刻度，摇匀，8000 r/min离心5 min，离心后取上清液5 mL于另一干净试管，待净化。

二、样品净化 （Copure^® HLB, 500 mg/6mL）

活化：固相萃取柱使用前依次用5 mL甲醇，5 mL 水活化。

上样：加入上述待净化液至固相萃取柱中。

淋洗：加入5 mL 10 %甲醇水淋洗固相萃取柱，弃去流出液。

洗脱：加入5 mL 50 %甲醇水溶液洗脱，收集洗脱液，混匀，过0.22 μm有机滤膜，上机。

二、仪器条件

 仪器：液相色谱仪，ThermoFisher U3000

 色谱柱：Agilent ZORBAX SB-C18 (4.6 mm×250 mm，5 μm)

 流动相：A：1.5 g/磷酸氢二铵溶液（用1.0 mol/L磷酸溶液调为3.0左右）

    B：50 %甲醇水溶液

 洗脱方式：梯度洗脱，见表1

  流速：1.0 mL/min      

柱温：25 ℃     

进样量：20 μL

 检测器：紫外检测器  

 检测波长：214 nm

表1 梯度洗脱程序

三、实验结果

（1）加标回收实验结果

表2 加标回收结果

（2）豆干和面包中丙酸色谱图

图1豆干中丙酸（空白）液相色谱图

图2 加标浓度为0.10 g/kg的豆干中丙酸液相色谱图

图2 加标浓度为0.10 g/kg的豆干中丙酸液相色谱图

图3 加标浓度为1.00 g/kg的豆干中丙酸液相色谱图

图4面包中丙酸（空白）液相色谱图

图5 加标浓度为0.10 g/kg的面包中丙酸液相色谱图

图6 加标浓度为1.00 g/kg的面包中丙酸液相色谱图

四、订购信息