玉米粉中黄曲霉毒素检测的高通量固相萃取方法

（Copure® 226多功能净化板）

 《GB 5009.22-2016  食品安全国家标准 食品中黄曲霉毒素B族和G族的测定》。

一、样品前处理

1.1  样品提取

（1）称取5 g试样于50 mL离心管中，加入一定量同位素内标工作液振荡混合后静置30 min。

（2）加入20 mL乙腈-水溶液（84+16），涡旋混匀，置于超声波/涡旋振荡器或摇床中振荡20 min，在6000 r/min下离心10 min，取上清液备用。

1.2  样品净化

（1）将24孔净化板放置在24孔收集板上，再向净化板孔中加入6mL样品提取液。

（2）将24孔净化板和收集板放置在24孔正压提取装置下，开启气阀开关，使净化板孔和输气孔保持对应，匹配良好。

（3）调整气体输出压力，使样品提取液过滤至收集板中。

（4）取4 mL样品净化液，40℃下氮气吹干，用1 mL初始流动相复溶，涡旋30s溶解残渣，过0.22μm微孔滤膜，上机分析。

二、仪器条件

仪器设备：UPLC-MS/MS(Thermo Scientific TSQ Endura)

色谱柱：Thermo C18   （2.1x100 mm， 1.7um）

流动相：A：0.1%甲酸水    B：乙腈

流动相梯度：初始80%A，20%A（0 min~2min），20%A（2min~3min），

80%A（3min~3.1min），80%A（3.1min~5min）

流速：0.3 mL/min

柱温：室温

进样体积：5.0 mL

质谱条件：

检测方式：多离子反应检测（MRM）；

表1离子源控制条件

表2离子选择参数

注：*为定量离子。

三、实验结果

图1  使用多功能净化板处理前后的脱色效果图

（①玉米粉样品-未净化处理    ②Copure®226多功能净化板-净化处理   ）

从图1中可知，经过Copure® 226多功能净化板净化处理后，提取液中色素被明显吸附，减少杂质干扰；图2中，杂质被明显吸附，TIC色谱图中杂峰更少，上机液更干净；24个孔中黄曲霉毒素的回收率均在90-110%之间，孔间回收率CV值小于5 %，能满足实验使用需求。

表3  玉米粉中黄曲霉毒素加标回收实验结果

图2  使用多功能净化板处理前后的TIC色谱图

（①玉米粉样品-未净化处理    ②Copure®226多功能净化板-净化处理   ）

四、订购信息