乳粉中三聚氰胺的液相色谱-紫外检测器检测方案（Copure^® MCX）

《GB/T 22388-2008 原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法》中第一法

一、样品提取  

准确称取1 g样品于干净离心管中，加入7.5 mL 5%三氯乙酸溶液和2.5 mL乙腈，涡旋混匀后超声提取10 min，再振荡提取10 min，12000 r/min离心5 min，取上清液于另一干净离心管中，重复上述操作一次，合并两次提取液，若提取液浑浊可多加一次低温离心，取上清液5 mL，加入5 mL水，混匀，作为待净化液，待过柱净化。

二、样品净化（Copure^® MCX,60mg/3mL）

活化：5 mL甲醇、5 mL水

上样：上述待净化液

淋洗：5 mL水，5 mL甲醇

洗脱：6 mL 8%氨水甲醇

收集全部洗脱液，50℃下氮吹干，残留物用1 mL流动相定容，涡旋混匀1 min，过尼龙滤膜，上机测定。

三、标准曲线溶液的制备

取适宜浓度的标准品，用流动相配制成上机浓度分别为200 μg/L，500 μg/L，1000 μg/L，2000 μg/L，5000 μg/L，10000 μg/L的标点，得到标准曲线。

四、仪器条件

（1）色谱条件

 仪器：液相色谱仪，Thermo Fisher U3000

 色谱柱：Agilent ZORBAX SB-C18 (4.6 mm×250 mm，5 μm)

 流动相：A：离子对缓冲试剂   B：乙腈

 洗脱方式：A：B=85:15，12 min

 流速：1 mL/min

 柱温：40℃

 检测波长：240 nm

 进样量：20 μL

五、实验结果

表1  乳粉中三聚氰胺加标回收实验结果

图1 1000 μg/L三聚氰胺标准品液相色谱图

图2 添加水平为2 mg/kg时牛初乳粉中三聚氰胺液相色谱图

图3 三聚氰胺校准曲线

图4 三聚氰胺光谱图

六、订购信息