沙氏葡萄糖琼脂培养基:食品微生物检验中真菌参比培养基的作用与质量控制

2026-06-18 13:48:59
逗点生物
简介

沙氏葡萄糖琼脂培养基(SDA):食品微生物检验中的真菌参比培养基

产品信息

项目 内容
产品名称 沙氏葡萄糖琼脂培养基
英文名称 Sabouraud Dextrose Agar
简称 SDA
产品货号 CB1098
产品规格 250 g/瓶
保质期 三年
产品用途 用作食品安全微生物检验标准中的参比培养基
配制量 65.0 g/L
最终pH(25℃) 5.6±0.2

培养基配方

成分 含量(g/L) 主要作用
蛋白胨 5.0 提供氮源、氨基酸和肽类营养
酪蛋白胨 5.0 提供氮源、肽类和生长所需营养物质
葡萄糖 40.0 提供丰富碳源和能量
琼脂 15.0 凝固剂,形成固体培养表面
最终pH(25℃) 5.6±0.2 偏酸性环境,有利于多数真菌生长

检验原理

SDA的核心特点是 高葡萄糖、偏酸性、营养组成稳定。葡萄糖为酵母菌和霉菌提供充足碳源,蛋白胨和酪蛋白胨提供氮源、氨基酸和肽类,琼脂形成稳定固体表面,便于菌落形成和观察。

pH 5.6±0.2 的偏酸性环境有利于多数真菌生长,并能在一定程度上抑制部分细菌。但普通SDA不含抗生素或强选择性抑制剂,因此不能完全抑制细菌背景菌。若样品细菌污染较重,应根据检测标准选择含抗生素的真菌培养基或其他指定培养基。

使用方法

称取本品 65.0 g,加入蒸馏水或去离子水 1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,121℃高压灭菌15 min。灭菌后冷却至约 50℃,倾注平皿备用。

制备时应避免长时间剧烈煮沸,防止葡萄糖受热降解、培养基颜色加深或水分蒸发导致浓度偏高。制备后的平板应表面平整、无污染、无明显气泡、无沉淀、无开裂,并保持适宜水分状态。

质量控制

下列质控菌株接种待测试培养基后,于 28℃±1℃培养72 h~96 h,结果应符合要求。

质控指标 质控菌株及编号 质控评定标准
促生长能力 黑曲霉 CMCC(F)98003 生长良好,白色菌丝,黑色孢子
促生长能力 白色念珠菌 CMCC(F)98001 生长良好,白色圆形菌落
促生长能力 酿酒酵母 CMCC(F)98018 生长良好,奶油色圆形菌落
促生长能力 桔青霉 CMCC(F)98028 生长良好,白色菌丝,绿色孢子
促生长能力 产黄青霉 CMCC(F)98801 生长良好,白色菌丝,绿色孢子

上述质控菌株覆盖酵母菌和霉菌两类真菌,可用于评价SDA对真菌菌落形成、菌丝生长和产孢能力的支持效果。若多株质控菌均生长不良,应重点检查培养基配制量、灭菌条件、pH、平板水分、保存状态和培养温度;若仅单一菌株异常,应同时排查菌株活力、传代次数和接种量。

作为参比培养基的意义

SDA作为参比培养基时,主要用于提供稳定的真菌生长对照。实验室可通过比较待测培养基与SDA上的质控菌株生长情况,评价待测培养基的促生长能力是否符合要求。

因此,SDA本身必须性能稳定。若SDA促生长能力不足,后续用其评价其他培养基时,结果就会失去参照意义。作为参比培养基使用时,应重点控制无菌性、pH、促生长能力、平板水分状态和批间一致性。

使用与保存建议

干粉培养基应密封、避光、干燥保存,防止吸潮、结块和变色。开瓶后应及时盖紧瓶盖,避免水分和污染物进入瓶内。

制备后的平板应按实验室SOP保存,并在经验证的有效期内使用。由于真菌培养时间较长,平板过湿可能导致孢子扩散和菌落融合,平板过干则可能影响孢子萌发和菌丝扩展。使用前应检查平板是否存在污染、失水、开裂、冷凝水过多或颜色异常等情况。

总结

沙氏葡萄糖琼脂培养基(SDA)是一种经典的真菌培养基,也是 GB 4789.28-2024 食品微生物学检验培养基质量控制体系中的重要参比培养基。其通过蛋白胨和酪蛋白胨提供氮源,以高浓度葡萄糖提供碳源和能量,并通过pH 5.6±0.2的偏酸环境支持酵母菌和霉菌生长。

在质量控制中,黑曲霉、白色念珠菌、酿酒酵母、桔青霉和产黄青霉应在规定条件下表现出生长良好及典型形态。只有确保培养基配制规范、无菌性良好、pH稳定、促生长能力合格,SDA才能在真菌培养和培养基质量评价中发挥可靠的参比作用。