孟加拉红培养基：霉菌和酵母计数中的选择性培养基

产品信息

培养基配方

检验原理

孟加拉红培养基的核心作用是为霉菌和酵母提供适宜营养，同时抑制细菌干扰。蛋白胨提供氮源和生长所需的基础营养，葡萄糖为霉菌和酵母提供能量来源，磷酸二氢钾和硫酸镁帮助维持较稳定的培养环境，琼脂形成固体培养基表面，便于菌落形成和计数。

孟加拉红是该培养基的重要选择性和辅助观察成分。一方面，它可对部分细菌产生抑制作用；另一方面，它能够限制某些快速生长霉菌菌落的直径和高度，减少菌落蔓延、重叠和融合，使计数更准确。孟加拉红还具有着色作用，霉菌或酵母菌落吸收后更易观察。

氯霉素属于广谱抗生素，在本培养基中主要用于抑制细菌背景菌生长。由于多数食品样品中的细菌生长速度远快于霉菌和酵母，如果不加以抑制，细菌可能迅速覆盖平板表面，影响目标菌的分离和计数。氯霉素的加入能够有效提高培养基对真菌检测的选择性。

使用方法

称取本品 36.6 g，加入蒸馏水或去离子水 1 L，搅拌加热至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌15 min。

制备时应充分溶解琼脂和各营养成分，避免局部焦化或沉淀。灭菌后冷却至适宜温度再倾注平板，平板应表面平整、颜色均一、无污染、无明显气泡和沉淀。由于霉菌和酵母培养时间较长，平板水分状态非常重要：平板过湿容易造成孢子扩散和菌落融合，过干则可能影响孢子萌发和菌落形成。

质量控制

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，于 28℃±1℃需氧培养120 h，结果应符合下表要求。

PR表示培养基对目标菌的促生长能力。酿酒酵母和黑曲霉应能在规定条件下良好生长，说明培养基能够支持酵母菌和霉菌形成典型菌落。G值用于评价选择性，大肠埃希氏菌和金黄色葡萄球菌应受到明显抑制，说明孟加拉红和氯霉素的选择性作用有效。

典型结果与判读要点

酿酒酵母在孟加拉红培养基上通常形成奶油色、圆形菌落；黑曲霉先形成白色菌丝，随后产生黑色孢子。霉菌和酵母菌落生长速度不同，计数时应在标准规定培养时间内观察，避免过早计数导致漏检，也避免培养过久造成菌落融合。

孟加拉红培养基用于霉菌和酵母计数，并不用于真菌种属的最终鉴定。不同霉菌在培养基上的菌落颜色、形态和产孢特征可作为初步观察依据，但若需要确认菌种，应结合显微镜形态、生化鉴定、质谱或分子生物学方法。

常见问题与控制建议

如果酿酒酵母或黑曲霉生长不良，应重点检查培养基是否过度灭菌、pH是否异常、干粉是否吸潮、平板是否过干、培养温度是否准确以及质控菌株活力是否正常。

如果大肠埃希氏菌或金黄色葡萄球菌抑制不足，应检查氯霉素有效性、培养基配制量、灭菌条件和保存状态。由于氯霉素对热稳定性和配方体系有一定要求，若培养基反复加热或保存不当，可能影响选择性。

平板保存过程中应避免强光照射。孟加拉红属于光敏性染料，长时间强光暴露可能影响培养基性能。制备后的平板应按实验室SOP避光、低温、密封保存，并在经验证的有效期内使用。

总结

孟加拉红培养基是一种用于霉菌和酵母计数、分离和培养的常用选择性培养基。其通过蛋白胨和葡萄糖提供营养，以磷酸盐和镁盐维持适宜生长环境，通过孟加拉红限制霉菌菌落扩展并辅助观察，再由氯霉素抑制细菌干扰。

本产品质量控制中，酿酒酵母菌 ATCC 9763 和黑曲霉 ATCC 16404 应达到 PR≥0.7，大肠埃希氏菌 ATCC 25922 和金黄色葡萄球菌 ATCC 6538 应受到明显抑制。只有在促生长能力、选择性、无菌性、平板水分和保存条件均受控的情况下，孟加拉红培养基才能为食品中霉菌和酵母计数提供可靠结果。