亚硫酸铋琼脂（BS）：沙门氏菌选择性分离中的经典培养基
- 2026-06-18 15:20:15
- 逗点生物
亚硫酸铋琼脂（BS）：沙门氏菌选择性分离中的经典培养基
产品信息
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 产品名称 | 亚硫酸铋琼脂 |
| 英文名称 | Bismuth Sulfite Agar |
| 简称 | BS琼脂 |
| 产品货号 | GF1014 |
| 产品规格 | 250 g/瓶 |
| 保质期 | 三年 |
| 产品用途 | 用于沙门氏菌选择性分离培养 |
| 适用标准 | ISO、FDA BAM、GB、SN 等沙门氏菌检验方法 |
| 配制量 | 47.3 g/L |
| 最终pH（25℃） | 7.5±0.2 |
培养基配方
| 成分 | 含量（g/L） | 主要作用 |
|---|---|---|
| 蛋白胨 | 10.0 | 提供氮源、氨基酸和小肽 |
| 牛肉浸粉 | 5.0 | 提供维生素、矿物质和生长因子 |
| 葡萄糖 | 5.0 | 提供可利用碳源和能量 |
| 硫酸亚铁 | 0.3 | 提供铁离子，用于硫化氢反应显色 |
| 磷酸氢二钠 | 4.0 | 缓冲剂，维持培养基pH稳定 |
| 煌绿 | 0.025 | 抑制部分革兰氏阳性菌及非目标菌 |
| 柠檬酸铋铵 | 2.0 | 提供铋盐，增强选择性并参与金属光泽形成 |
| 亚硫酸钠 | 6.0 | 选择性抑制剂，同时作为硫化物反应底物 |
| 琼脂 | 15.0 | 凝固剂，形成固体培养表面 |
| 最终pH（25℃） | 7.5±0.2 | 适合沙门氏菌选择性分离及典型菌落形成 |
检验原理
BS琼脂的核心原理是 选择性抑制+硫化氢反应+铋盐还原显色。蛋白胨和牛肉浸粉提供基础营养，葡萄糖为细菌生长提供能量，磷酸氢二钠维持培养基pH稳定，使沙门氏菌能够在选择性压力下形成可观察菌落。
培养基中的煌绿、亚硫酸钠和铋盐构成选择性体系，可抑制多数革兰氏阳性菌、部分大肠埃希氏菌及其他非目标菌。原资料中“对伤寒、副伤寒等沙门氏菌的生长没有影响”的表述应适当修正：BS琼脂对沙门氏菌相对允许生长，但仍具有较强选择性，不同沙门氏菌血清型和不同生理状态菌株的生长能力可能存在差异。受损沙门氏菌在BS琼脂上可能生长较弱，因此标准检验中通常需要先经过非选择性预增菌和选择性增菌，再进行平板分离。
沙门氏菌中许多菌株能还原亚硫酸盐或产生硫化氢，硫化氢与铁盐反应生成黑色硫化铁沉淀，使菌落或菌落中心变黑。部分沙门氏菌还能还原铋离子形成金属铋，使菌落呈现黑色、灰绿色或带金属光泽的外观，这是BS琼脂区别于许多其他沙门氏菌分离培养基的重要特征。
使用方法
称取本品 47.3 g，加入蒸馏水或去离子水 1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，冷却至约 50℃，充分摇匀后倾注无菌平皿，待凝固后备用。
BS琼脂含有不溶性或微溶性成分，配制后呈浑浊状属于正常现象。倾注平板前应充分摇匀，使悬浮成分分布均匀，否则可能导致平板颜色、选择性或菌落表现不一致。
BS琼脂不宜高压灭菌，也不宜长时间过度加热。过度加热可能破坏选择性体系，影响铋盐和亚硫酸盐反应，导致背景菌抑制不足或沙门氏菌典型菌落表现减弱。建议使用前一天制备，避光保存，并尽快使用；保存时间过长时，培养基选择性可能下降，影响检测结果。
质量控制
下列质控菌株接种后，于 36℃±1℃需氧培养40 h～48 h，观察结果应符合要求。
| 质控指标 | 质控菌株及编号 | 质控评定标准 |
|---|---|---|
| 生长率 | 伤寒沙门氏菌 CMCC(B)50071 | PR≥0.5；黑色菌落，有金属光泽 |
| 生长率 | 鼠伤寒沙门氏菌 ATCC 14028 | PR≥0.5；黑色或灰绿色菌落，有金属光泽 |
| 选择性 | 大肠埃希氏菌 ATCC 25922 | G≤1 |
| 选择性 | 粪肠球菌 ATCC 29212 | G≤1 |
PR表示培养基对目标菌株的生产率或生长率，用于评价沙门氏菌在培养基上的回收能力。G值用于评价培养基对非目标菌的抑制能力。伤寒沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏菌应形成典型黑色、灰绿色或具金属光泽菌落；大肠埃希氏菌和粪肠球菌应受到明显抑制。
典型菌落与判读要点
沙门氏菌在BS琼脂上的菌落通常表现为黑色、棕黑色或灰绿色，部分菌落可带金属光泽，培养时间延长后菌落周围培养基也可能变暗。伤寒沙门氏菌常形成黑色且具有金属光泽的典型菌落，鼠伤寒沙门氏菌可表现为黑色或灰绿色并带金属光泽。
需要注意的是，并非所有沙门氏菌都表现完全典型。部分菌株硫化氢产生较弱，菌落颜色可能较浅；部分非目标菌也可能产生黑色或类似菌落。因此，BS琼脂上的“黑色有金属光泽菌落”只能作为可疑沙门氏菌筛选依据，不能作为最终判定结果。正式检测中，应挑取可疑菌落进行后续纯化和生化、血清学或分子确认。
常见问题与控制建议
如果沙门氏菌生长不良，应重点检查培养基是否过度加热、平板是否保存时间过长、pH是否异常、干粉是否吸潮、接种菌株是否受损以及增菌流程是否充分。BS琼脂选择性较强，目标菌受损时更容易出现回收率下降。
如果大肠埃希氏菌或粪肠球菌抑制不足，可能与培养基配制浓度、加热条件、平板保存时间、煌绿或铋盐体系有效性有关。由于BS琼脂选择性会随保存时间变化，建议平板按规定条件避光保存并尽快使用。
若平板出现沉淀、浑浊或颜色不均，不一定代表不合格。BS琼脂本身含有不溶性成分，正常状态下可呈浑浊状。关键是倾注前充分摇匀，并通过质控菌株验证其促生长能力、选择性和典型菌落表现。
应用边界
BS琼脂主要用于沙门氏菌选择性分离，尤其对伤寒沙门氏菌等部分沙门氏菌具有较好的分离指示效果。但在现代沙门氏菌检测流程中，通常还会配合XLD琼脂、HE琼脂、显色培养基或其他选择性平板共同使用，以提高不同血清型和不同样品背景下的检出率。
食品样品中沙门氏菌常处于低数量或受损状态，并伴有复杂背景菌。因此，检测流程一般包括样品预增菌、选择性增菌、选择性平板分离、可疑菌落纯化和鉴定确认。BS琼脂只是其中的分离筛选环节之一，不应单独替代完整标准方法。
总结
亚硫酸铋琼脂（Bismuth Sulfite Agar，BS）是一种用于沙门氏菌选择性分离培养的经典培养基。其通过煌绿、亚硫酸钠和铋盐形成选择性体系，抑制多数非目标菌；同时利用沙门氏菌还原亚硫酸盐生成硫化氢并与铁盐反应形成黑色沉淀，以及还原铋盐产生金属光泽，从而形成具有鉴别意义的典型菌落。
本产品按 47.3 g/L 配制，制备时应避免高压灭菌和过度加热，倾注前充分摇匀，平板应避光保存并尽快使用。质量控制中，伤寒沙门氏菌 CMCC(B)50071 和鼠伤寒沙门氏菌 ATCC 14028 应达到 PR≥0.5，并形成黑色或灰绿色、有金属光泽的菌落；大肠埃希氏菌 ATCC 25922 和粪肠球菌 ATCC 29212 应受到明显抑制。只有在制备、保存、质控和判读均规范的情况下，BS琼脂才能为沙门氏菌分离筛选提供可靠支持。
