志贺氏菌增菌肉汤：志贺氏菌选择性增菌中的关键培养基

产品信息

志贺氏菌增菌肉汤采用营养支持与选择性抑制相结合的设计思路，在保证志贺氏菌恢复和增殖的同时，尽可能抑制伴生菌生长。

成分	含量	在培养基中的作用与用途
胰蛋白胨	20.0 g/L	培养基的主要营养来源，提供氨基酸、多肽、维生素及氮源，满足志贺氏菌生长和修复受损细胞的需求，是增菌培养的重要基础成分。
磷酸二氢钾（KH₂PO₄）	2.0 g/L	与磷酸氢二钾共同组成缓冲体系，维持培养过程中pH稳定，避免因细菌代谢产酸导致环境变化影响志贺氏菌生长。
磷酸氢二钾（K₂HPO₄）	2.0 g/L	与磷酸二氢钾协同发挥缓冲作用，同时提供少量磷元素，参与细胞代谢过程。
氯化钠	5.0 g/L	维持培养基适宜的渗透压，保证细胞内外环境平衡，促进细菌正常生长。
葡萄糖	1.0 g/L	提供易利用的碳源和能量来源，为志贺氏菌增殖提供代谢底物，同时有助于受损菌的恢复。
吐温80	1.5 mL/L	非离子型表面活性剂，可促进样品均匀分散，减少脂类物质对细菌的包裹作用，并可中和部分抑菌物质，提高受损志贺氏菌的恢复能力。
配套试剂TJ006	按说明加入	选择性添加剂，通常含有新生霉素等抑菌成分，可抑制革兰氏阳性菌及部分竞争菌生长，提高志贺氏菌的增菌效率和检出率。
最终pH（25℃）	7.0±0.2	接近中性的环境有利于志贺氏菌恢复和生长，同时保证培养基选择性稳定。

注：原始资料中“磷酸二氢钾”重复出现，根据培养基原理及常见标准配方，应修正为“磷酸二氢钾2.0 g/L”和“磷酸氢二钾2.0 g/L”。

志贺氏菌增菌肉汤的设计目标是在复杂样品中优先促进志贺氏菌生长。培养基中的胰蛋白胨和葡萄糖为细菌提供充足营养和能量，使受损细胞得到恢复；磷酸盐缓冲体系维持培养环境稳定；氯化钠保证适宜渗透压；吐温80帮助样品均匀分散并减轻部分抑制因素影响。

与此同时，配套添加剂TJ006中的选择性抑菌成分能够抑制革兰氏阳性菌及部分背景菌生长，从而减少竞争菌干扰，使志贺氏菌在增菌过程中获得生长优势。

由于志贺氏菌对环境变化较为敏感，因此培养温度、培养时间、厌氧条件以及添加剂浓度均需严格按照标准要求执行，以保证最佳增菌效果。

称取本品 31.5 g，加入蒸馏水或去离子水 1 L，充分搅拌并加热煮沸至完全溶解。

分装于三角瓶中，每瓶 225 mL，于 121℃高压灭菌15 min。

灭菌后冷却至 50℃以下，每225 mL培养基加入 1支配套试剂TJ006，充分混匀后备用。

制备完成的培养基应呈均匀澄清状态，无明显沉淀、污染或颜色异常。使用前应检查培养基外观、pH值及添加剂加入情况。

下列质控菌株接种后，于 41.5℃±0.5℃厌氧培养16～20 h，再转种至相应培养基进行观察。

质控指标	质控菌株及编号	质控评定标准
生长率	福氏志贺氏菌 CMCC(B)51572	转种XLD后＞10 CFU；形成无色至粉红色、半透明菌落
选择性	金黄色葡萄球菌 ATCC 6538	转种TSA后＜100 CFU

福氏志贺氏菌应能够在培养基中得到有效恢复和增殖，而金黄色葡萄球菌等革兰氏阳性菌则应受到明显抑制，从而验证培养基的增菌能力和选择性。

增菌结束后，应转种至XLD琼脂、麦康凯琼脂或其他标准规定的选择性分离培养基。

志贺氏菌在XLD琼脂上通常形成无色至红色、半透明菌落，一般不产生硫化氢；在麦康凯琼脂上多表现为无色或浅色半透明菌落。由于不同菌株之间可能存在形态差异，因此所有可疑菌落均需进一步进行生化鉴定和血清学确认。

需要强调的是，增菌肉汤出现浑浊仅表示细菌生长，并不能直接判定志贺氏菌阳性，最终结果必须结合后续鉴定实验综合分析。

若志贺氏菌增殖效果不理想，应重点检查培养基浓度、pH值、灭菌条件、添加剂加入时机、培养温度以及菌株活力等因素。特别是培养温度应严格控制在 41.5℃±0.5℃ 范围内。

若背景菌生长过多或金黄色葡萄球菌抑制不足，应检查TJ006是否正确添加、保存条件是否符合要求，以及培养基是否存在配制误差。

加入选择性添加剂后的培养基应尽快使用，不宜长期存放，以避免选择性下降。干粉培养基应密封保存于阴凉干燥处，防止吸潮结块和成分失效。

志贺氏菌增菌肉汤主要用于食品微生物检测中的选择性增菌步骤，其作用是提高目标菌检出概率，而非直接完成分离或鉴定。

完整的志贺氏菌检测流程通常包括样品预处理、选择性增菌、选择性分离培养、纯培养、生化鉴定、血清学鉴定以及必要的分子生物学检测。只有结合完整检测流程，才能获得准确可靠的检测结果。

志贺氏菌增菌肉汤（Shigella Broth）是一种专门用于志贺氏菌选择性增菌的液体培养基。培养基中的胰蛋白胨提供丰富营养，葡萄糖提供能量，磷酸盐体系维持稳定pH，氯化钠调节渗透压，吐温80促进受损菌恢复，而配套选择性添加剂则有效抑制背景菌生长。

通过合理的营养支持与选择性抑制机制，该培养基能够显著提高志贺氏菌在复杂样品中的检出率，是食品微生物检测和卫生监测实验室常用的重要增菌培养基之一。