Baird-Parker 琼脂基础:金黄色葡萄球菌选择性分离培养基的原理与应用
- 2026-06-18 16:32:14
- 逗点生物
Baird-Parker 琼脂基础:金黄色葡萄球菌选择性分离培养基的原理与应用
产品基本信息
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 产品名称 | Baird-Parker 琼脂基础 |
| 英文名称 | Baird-Parker Agar Base |
| 产品货号 | GF1024 |
| 产品规格 | 250 g/瓶 |
| 产品用途 | 用于金黄色葡萄球菌的选择性分离培养 |
| 参考方法 | ISO、FDA BAM、GB、SN 等标准方法 |
| 保质期 | 三年 |
配方组成、用量、作用及用途
| 成分 | 用量(g/L) | 主要作用 | 用途说明 |
|---|---|---|---|
| 胰蛋白胨 | 10.0 | 提供氮源、氨基酸和短肽 | 支持葡萄球菌及部分耐受菌生长,是基础营养来源之一 |
| 牛肉膏 | 5.0 | 提供碳源、氮源、维生素和生长因子 | 改善金黄色葡萄球菌的生长状态,促进菌落形成 |
| 酵母膏 | 1.0 | 提供 B 族维生素、氨基酸和生长促进物质 | 补充营养,提高培养基促生长能力 |
| 丙酮酸钠 | 10.0 | 生长促进剂和保护性成分 | 可促进受损或应激状态下葡萄球菌恢复生长,并有助于提高目标菌检出率 |
| 甘氨酸 | 12.0 | 选择性和促生长相关成分 | 在一定浓度下有利于葡萄球菌生长,同时对部分非目标菌形成抑制压力 |
| 氯化锂 | 5.0 | 选择性抑制剂 | 抑制部分非葡萄球菌及背景菌,提高对葡萄球菌的选择性 |
| 琼脂 | 15.0 | 凝固剂 | 形成固体平板,便于菌落分离、观察和挑取 |
| 卵黄亚碲酸钾增菌液 | 每 95 mL 基础培养基加入 5 mL | 提供卵黄和亚碲酸钾 | 卵黄用于观察卵磷脂酶和脂酶反应;亚碲酸钾抑制杂菌并参与黑色菌落形成 |
| pH(25℃) | 7.0 ± 0.2 | 提供适宜反应环境 | 保证目标菌生长、选择性和卵黄反应稳定 |
检验原理
Baird-Parker 琼脂的鉴别核心主要包括三方面:亚碲酸盐还原、卵黄反应和选择性抑菌。
金黄色葡萄球菌中的许多凝固酶阳性菌株可还原亚碲酸钾,使菌落呈灰黑色至黑色,并形成凸起、有光泽的典型菌落。卵黄中的卵磷脂和脂类物质可被部分葡萄球菌产生的卵磷脂酶、脂酶等分解,菌落周围常出现混浊带,并在外层形成透明圈。这种“黑色菌落 + 混浊带 + 透明圈”的组合特征,是筛选疑似金黄色葡萄球菌的重要依据。
选择性方面,氯化锂、甘氨酸和亚碲酸钾共同抑制部分非目标菌。丙酮酸钠则有助于促进受损葡萄球菌恢复,减少因样品处理、干燥、冷藏或其他胁迫因素造成的漏检风险。需要注意的是,Baird-Parker 琼脂上的典型菌落只能作为疑似结果,最终仍需结合凝固酶试验、乳胶凝集试验、生化鉴定或其他确证方法进行判断。
使用方法
称取本品 58.0 g,加入蒸馏水或去离子水 950 mL,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶后于 121℃高压灭菌 15 min。灭菌结束后冷却至约 50℃,按每 95 mL 基础培养基加入 5 mL 卵黄亚碲酸钾增菌液,充分混匀后倾注平皿备用。
加入卵黄亚碲酸钾增菌液后不宜再次高压灭菌。温度过高可能破坏卵黄成分或影响亚碲酸钾稳定性,温度过低则容易导致琼脂凝固和添加剂分布不均。混匀时应避免剧烈振摇,以减少气泡和卵黄成分破坏。
典型菌落特征
在 36℃培养 24 h 后,典型金黄色葡萄球菌在 Baird-Parker 琼脂上通常形成黑色、圆形、凸起、有光泽的菌落,菌落周围可见混浊带,外层常伴透明圈。部分非金黄色葡萄球菌也可能还原亚碲酸盐形成黑色菌落,但通常缺乏典型的卵黄反应。
| 菌株或菌群 | 典型表现 |
|---|---|
| 金黄色葡萄球菌 | 黑色凸起菌落,周围有混浊带,外层有透明圈 |
| 表皮葡萄球菌 | 可形成黑色菌落,但通常无明显混浊带和透明圈 |
| 大肠埃希氏菌 | 生长受到明显抑制或不生长 |
实际判读时应结合培养时间、菌落大小、颜色、透明圈和混浊带特征综合观察。若培养时间不足,卵黄反应可能不明显;若培养时间过长,背景菌或非典型反应可能增加,影响疑似菌落挑取。
质量控制
下列质控菌株接种后,于 36℃培养 24 h,观察生长和菌落特征。
| 质控指标 | 质控菌株及编号 | 质控评定标准 |
|---|---|---|
| 生长率 | 金黄色葡萄球菌 ATCC 25923 | PR ≥ 0.7;菌落黑色凸起,周围有一混浊带,外层有一透明圈 |
| 特异性 | 表皮葡萄球菌 CMCC(B)26069 | 黑色菌落,无混浊带和透明圈 |
| 选择性 | 大肠埃希氏菌 ATCC 25922 | G ≤ 1,生长应受到明显抑制 |
PR 值用于评价培养基对目标菌的促生长能力。若金黄色葡萄球菌生长率偏低,应检查基础培养基称量、灭菌条件、pH、卵黄亚碲酸钾增菌液质量、添加温度、平板储存状态及菌株活性。若大肠埃希氏菌生长明显,则可能提示选择性成分不足、添加剂失效或配制过程存在偏差。
使用注意事项
Baird-Parker 琼脂基础需配合卵黄亚碲酸钾增菌液使用。基础培养基灭菌后应冷却至约 50℃再加入添加剂,并充分混匀后倾注平板。加入添加剂后的培养基不应再次高压灭菌,也不宜长时间高温保温。
制备好的平板应表面平整、颜色均匀,无污染、无明显气泡、无干裂或大量析水。平板储存时应避光、冷藏,并在验证有效期内使用。干粉培养基使用后应立即密封,置于避光、干燥处,避免吸潮结块或成分降解。
在结果判读时,典型菌落应作为疑似金黄色葡萄球菌进行挑取,但不能仅凭平板形态作最终判定。部分凝固酶阴性葡萄球菌也可能形成黑色菌落,部分受损金黄色葡萄球菌的卵黄反应也可能较弱。因此,疑似菌落应按照相应 ISO、FDA BAM、GB 或 SN 标准方法进行后续确证。
总体而言,Baird-Parker 琼脂基础通过丰富营养、选择性抑菌、亚碲酸盐还原和卵黄反应相结合,可有效用于金黄色葡萄球菌的选择性分离培养,是食品及相关样品中金黄色葡萄球菌检测的重要选择性鉴别培养基之一。




