胰酪胨大豆多黏菌素肉汤基础：蜡样芽孢杆菌增菌与 MPN 测定培养基

产品基本信息

配方组成、用量、作用及用途

培养基原理

胰酪胨和植物蛋白胨为蜡样芽孢杆菌提供氨基酸、短肽、氮源和生长因子，葡萄糖提供易利用碳源，帮助目标菌在增菌初期快速恢复并增殖。磷酸氢二钾具有缓冲作用，可减轻培养过程中 pH 波动对菌体生长的影响。氯化钠则用于维持培养基渗透压稳定。

加入多黏菌素 B 后，培养基具有一定选择性。多黏菌素 B 对许多革兰氏阴性菌具有抑制作用，可降低样品中部分竞争菌的干扰。但它并不能抑制所有杂菌，也不能直接完成蜡样芽孢杆菌鉴定。因此，增菌后仍需转接至 MYP 琼脂等选择性分离培养基，并结合菌落特征、生化反应或其他确证方法进行判断。

在 MPN 测定中，该培养基用于不同稀释度样品的增菌培养。培养后根据阳性管情况，再结合后续分离确认结果，计算样品中蜡样芽孢杆菌的最可能数。

使用方法

称取本品 30.0 g，加入蒸馏水或去离子水 1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，于 121℃高压灭菌 15 min。灭菌后冷却至 50℃以下，按检测方法要求加入配套试剂：每 100 mL 培养基基础添加 1 支 TJ026；或每 225 mL 培养基基础添加 1 支 TJ024，充分混匀后备用。

多黏菌素 B 不宜随基础培养基一起高压灭菌。添加时培养基温度应控制在 50℃以下，以减少抗生素活性损失。加入配套试剂后应充分混匀，避免局部浓度不均影响目标菌恢复或背景菌抑制效果。

典型应用

胰酪胨大豆多黏菌素肉汤基础主要用于蜡样芽孢杆菌检测流程中的选择性增菌步骤，也可用于蜡样芽孢杆菌 MPN 值测定。样品经适当前处理后接种于该培养基中培养，使目标菌数量增加，再转接至 MYP 琼脂等选择性分离培养基进行观察。

在 MYP 琼脂上，典型蜡样芽孢杆菌通常表现为粉红色至微粉红色菌落，周围可出现卵磷脂酶反应形成的沉淀环。由于部分其他芽孢杆菌也可能出现相似反应，疑似菌落仍需结合后续确认试验判断。

质量控制

下列质控菌株接种后，于 36±1℃培养 48 h，观察增菌和选择性效果。

蜡样芽孢杆菌应在本培养基中良好增殖，并在 MYP 琼脂上形成符合特征的菌落，说明培养基具有合格的促生长能力。大肠埃希氏菌作为革兰氏阴性受抑制菌株，应受到多黏菌素 B 的明显抑制。

若蜡样芽孢杆菌生长不足，应检查培养基称量、溶解、灭菌条件、pH、配套试剂加入温度、菌株活性和培养时间。若大肠埃希氏菌生长过多，则可能与多黏菌素 B 添加量不足、试剂失效、加入温度过高或培养基储存条件不当有关。

使用注意事项

本产品为培养基基础，需加入配套多黏菌素 B 试剂后使用。加入选择性试剂后的培养基不应再次高压灭菌，也不宜长时间高温放置。配制后的培养基应按实验室验证条件保存，并在规定有效期内使用。

该培养基用于选择性增菌和 MPN 测定，不能单独作为蜡样芽孢杆菌最终鉴定依据。增菌后应转接至 MYP 等选择性分离培养基，并结合菌落形态、卵磷脂酶反应、生化试验或标准方法要求的确证步骤进行判断。

干粉培养基使用后应立即密封，置于避光、干燥处保存，避免吸潮、结块或成分降解。若配制后的培养基出现污染、明显沉淀、颜色异常或容器破损，不宜用于正式检测。

总体而言，胰酪胨大豆多黏菌素肉汤基础通过丰富营养支持蜡样芽孢杆菌恢复和增殖，并利用多黏菌素 B 抑制部分革兰氏阴性背景菌，适用于蜡样芽孢杆菌的选择性增菌培养和 MPN 值测定，是相关食品微生物检测流程中的常用培养基之一。