含 0.6% 酵母浸膏的胰酪胨大豆肉汤:李斯特氏菌培养常用营养增菌培养基

2026-06-18 17:35:30
逗点生物
简介

含 0.6% 酵母浸膏的胰酪胨大豆肉汤:李斯特氏菌培养常用营养增菌培养基

产品基本信息

项目 内容
产品名称 含 0.6% 酵母浸膏的胰酪胨大豆肉汤
英文名称 Tryptic Soy Broth with 0.6% Yeast Extract
产品货号 GF1042
产品规格 250 g/瓶
产品用途 用于李斯特氏菌的培养
参考方法 GB、FDA BAM、SN、ISO 等相关标准
保质期 三年

配方组成、用量、作用及用途

成分 用量(g/L) 主要作用 用途说明
胰胨 17.0 提供氮源、氨基酸、短肽和部分碳源 作为主要营养来源,支持李斯特氏菌恢复和增殖
多价胨 3.0 提供复合氮源、肽类和生长促进物质 与胰胨形成营养互补,提高培养基促生长能力
酵母膏粉 6.0 提供 B 族维生素、氨基酸、核苷酸和生长因子 增强对李斯特氏菌的营养支持,有利于受损菌株复苏
氯化钠 5.0 维持培养基渗透压 保持细菌细胞正常生理状态,维持培养体系稳定
磷酸氢二钾 2.5 缓冲剂 维持培养基 pH 相对稳定,减少代谢产物引起的酸碱波动
葡萄糖 2.5 易利用碳源 为细菌早期生长提供能量来源,促进增菌效果
最终 pH(25℃) 7.2 ± 0.2 提供适宜培养环境 有利于李斯特氏菌生长及培养基性能稳定

培养基原理

TSB-YE 的核心作用是为李斯特氏菌提供丰富、均衡的营养环境。胰胨和多价胨可提供细菌生长所需的氨基酸、短肽和氮源;酵母膏粉富含 B 族维生素、核苷酸和多种生长因子,可促进李斯特氏菌从受损状态恢复,并提高培养过程中的生长活力。

葡萄糖是易利用碳源,可为细胞代谢提供能量。磷酸氢二钾起缓冲作用,有助于维持培养基 pH 稳定,避免细菌代谢过程中酸碱变化过大影响生长。氯化钠则用于维持适宜渗透压,使细胞处于相对稳定的培养环境中。

由于本培养基本身不含胆盐、抗生素、染料等强选择性成分,它更适合用于李斯特氏菌的培养、活化、复苏或非选择性增菌步骤。对于复杂样品中的李斯特氏菌检测,通常还需要结合选择性增菌培养基、选择性分离平板和确证试验完成最终判断。

使用方法

称取本品 36.0 g,加入蒸馏水或去离子水 1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装后于 121℃高压灭菌 15 min,冷却后备用。

配制时应确保干粉完全溶解,分装容器应洁净并适合高压灭菌。灭菌后的培养基应澄清或基本澄清,无污染、异常沉淀或明显颜色异常。使用前应检查培养基状态,并按对应标准方法或实验室验证条件确定接种量、培养温度和培养时间。

典型应用

TSB-YE 常用于李斯特氏菌相关检测流程中的培养、复苏和增菌步骤。对于标准菌株活化、疑似菌株培养、后续鉴定前的纯培养制备,以及某些检测流程中的非选择性恢复培养,TSB-YE 都可提供较好的营养支持。

在食品和环境样品检测中,如果目标菌数量较低或可能存在受损细胞,使用营养较丰富的培养基有助于提高目标菌恢复能力。但由于该培养基选择性较弱,样品背景菌复杂时,通常不能单独依靠 TSB-YE 完成目标菌筛选,仍需根据标准方法进入选择性增菌和选择性分离步骤。

质量控制

下列质控菌株接种后,于 36℃培养 24 h,观察生长情况。

指标 质控菌株及编号 质控评定标准
生长率 单核细胞增生李斯特氏菌 ATCC 19115 混浊度 2

单核细胞增生李斯特氏菌在本培养基中应表现为良好生长,培养液出现明显浑浊,说明培养基具有合格的促生长能力。若培养后浑浊度不足,应检查培养基称量、溶解、灭菌条件、pH、干粉保存状态、菌株活性、接种量和培养温度是否符合要求。

使用注意事项

本培养基为营养型液体培养基,不宜直接作为李斯特氏菌最终鉴定依据,也不能替代 PALCAM、Oxford、显色培养基等选择性分离培养基。若用于标准检测流程,应严格按照 GB、FDA BAM、SN、ISO 等相应方法进行后续选择性增菌、分离培养和确证鉴定。

干粉培养基使用后应立即密封,置于避光、干燥处保存,防止吸潮、结块或成分降解。配制后的培养基应按实验室规定条件保存,并在验证有效期内使用。若培养基出现污染、明显沉淀、颜色异常或容器破损,不宜用于正式检测。

总体而言,含 0.6% 酵母浸膏的胰酪胨大豆肉汤是一种营养丰富、适合李斯特氏菌恢复和培养的基础液体培养基。它通过胰胨、多价胨、酵母膏粉、葡萄糖和缓冲体系共同作用,为李斯特氏菌提供良好的生长环境,是李斯特氏菌检测流程中常用的培养和复苏培养基之一。