伊红美蓝琼脂培养基（EMB）：大肠菌群和革兰氏阴性肠道菌分离鉴别培养基

产品基本信息

配方组成、用量、作用及用途

EMB 琼脂的选择性主要来自伊红和美蓝。两种染料对革兰氏阳性菌具有一定抑制作用，使革兰氏阴性肠道菌更容易生长和分离。但这种抑制并非绝对，部分耐受菌仍可能生长，因此 EMB 的结果应作为初筛依据。

鉴别性来自乳糖发酵反应。大肠埃希氏菌等强乳糖发酵菌能快速发酵乳糖产酸，使菌落及周围环境酸化。酸性条件下，伊红和美蓝与细菌代谢产物发生沉淀和染色反应，形成紫黑色或黑心菌落；典型大肠埃希氏菌常可呈绿色金属光泽。产气肠杆菌等部分乳糖发酵菌可能形成较大、黏液状、粉紫色或紫色菌落，但金属光泽通常不如大肠埃希氏菌明显。

非乳糖发酵菌，如部分沙门氏菌和志贺氏菌，在 EMB 琼脂上通常不产生明显酸化反应，因此菌落多为无色、淡色或半透明。需要注意的是，不同菌株、培养时间、接种量、平板厚度和培养基状态均会影响菌落颜色和金属光泽表现，最终鉴定仍需结合后续生化或分子方法。

使用方法

称取本品 37.5 g，加入蒸馏水或去离子水 1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装后于 121℃高压灭菌 15 min。灭菌后冷却至约 45～50℃，倾注平板备用。

由于培养基中含有伊红和美蓝，配制时应充分混匀，使染料分布均匀。制备好的平板应颜色均一、表面平整，无污染、干裂、大量析水或异常沉淀。储存时应尽量避光，以减少染料受光照影响导致性能下降。

典型菌落特征

经 35～37℃培养 24 h 后，不同肠道菌在 EMB 琼脂上的菌落表现具有一定差异。

EMB 平板上出现具有金属光泽的深色菌落时，可作为大肠埃希氏菌的疑似特征；但金属光泽不是最终鉴定标准。疑似菌落应进一步进行纯化、革兰染色、生化试验或标准方法规定的确证步骤。

质量控制

下列质控菌株接种待测试培养基后，于 35～37℃培养 24 h，观察生长、菌落特征和选择性表现。

大肠埃希氏菌应生长良好并形成黑心或紫黑色菌落，可伴绿色金属光泽，说明培养基对乳糖发酵菌的显色能力正常。鼠伤寒沙门氏菌应形成无色半透明菌落，说明培养基可区分非乳糖发酵菌。金黄色葡萄球菌应受到明显抑制，说明伊红和美蓝的选择性作用符合要求。

若大肠埃希氏菌生长率偏低或金属光泽不明显，应检查培养基称量、溶解、灭菌条件、pH、染料质量、平板厚度、培养时间、菌株活性和储存条件。若金黄色葡萄球菌生长明显，则可能提示染料浓度不足、培养基配制错误、灭菌或保存条件不当。

使用注意事项

EMB 琼脂为选择性鉴别培养基，不适合作为普通通用营养培养基，也不能单独作为大肠埃希氏菌、沙门氏菌或其他肠道菌的最终鉴定依据。疑似菌落应根据检测目的和相关标准方法进行后续确认。

干粉培养基使用后应立即密封，置于避光、干燥处保存，避免吸潮、结块或染料成分降解。配制好的平板应避光保存，并在验证有效期内使用。若平板出现污染、干裂、明显析水、颜色异常或染料沉淀严重，不宜用于正式检测。

结果判读时应结合对照菌株和培养时间。培养过短可能导致显色不足，培养过长则可能出现颜色加深、扩散或背景变化，影响菌落判断。对于典型或可疑菌落，建议及时挑取纯化，避免过度培养造成形态改变。

总体而言，伊红美蓝琼脂培养基（EMB）通过蛋白胨提供营养，乳糖提供发酵鉴别底物，伊红和美蓝实现选择性抑菌及酸性沉淀显色，可用于革兰氏阴性肠道菌，特别是大肠菌群和粪大肠菌群的分离与初步鉴别，是微生物检测中常用的经典选择性鉴别培养基之一。