KF链球菌琼脂培养基：粪性链球菌选择性分离与计数培养基

产品信息与用途

使用时称取本品 76.4 g，加入蒸馏水或去离子水 1 L，加热搅拌至完全溶解。冷却至 50～60 ℃时，每 100 mL 培养基加入配套试剂 TJ038 1 支，混匀后倾注平板备用。最终 pH 为 7.2±0.2（25 ℃）。

KF链球菌琼脂的核心原理是“选择性抑制 + TTC显色反应”。培养基中的叠氮化钠对革兰氏阴性菌具有显著抑制作用，从而提高肠球菌的检出选择性。

肠球菌能够在该培养基中良好生长，并具有还原氯化三苯基四氮唑（TTC）的能力。TTC在被还原后生成红色不溶性甲臢（formazan）沉淀，使菌落呈现典型的深红色或砖红色外观，从而便于计数与识别。

培养基中的胨蛋白胨、酵母浸粉提供基础营养物质，麦芽糖和乳糖作为可发酵碳源参与代谢过程，甘油磷酸钠既提供碳源又起缓冲作用，维持菌体代谢稳定。琼脂作为固体支撑介质，使菌落形态得以清晰呈现。

需要注意的是，该培养基虽具有一定选择性，但仍可能有少量耐叠氮化钠菌株生长，因此菌落确认应结合镜检及后续生化试验进行综合判定。

质控菌株接种后于 35～37 ℃培养 48 h，观察生长情况及菌落颜色特征。

其中PR表示生长恢复率，用于评价目标菌在培养基中的生长能力；G≤1表示受抑制菌生长极弱或不生长，用于评价培养基选择性。理想状态下，粪性链球菌应呈现清晰红色菌落，而非目标菌应受到明显抑制。

在实际使用过程中，应严格控制配套试剂（TJ038）加入温度，需在培养基冷却至 50～60 ℃后加入，以避免TTC等显色组分失活或降解。混匀应充分，确保显色体系均匀分布，否则可能出现局部显色不一致影响计数。

培养时建议采用标准平板计数法或膜过滤法，并在 35～37 ℃条件下培养 48 h。培养时间不足可能导致显色不充分，而过长培养可能出现背景加深或非特异性显色增强，影响判读准确性。

对于菌落判读，应重点观察菌落颜色是否为典型深红色或砖红色，并结合菌落形态综合判断。若出现可疑菌落，应进一步进行生化鉴定或确认试验。

干粉培养基应密封保存于阴凉、干燥、避光环境中，避免吸潮导致结块或成分降解。开封后应尽快使用，并保持瓶口密封。

本产品仅用于实验室微生物检测，不得用于临床诊断或人体相关用途。操作过程中应注意粉尘防护，避免吸入刺激性颗粒。

实验结束后所有带菌培养物及耗材应按生物安全要求处理，一般采用 121 ℃高压灭菌 30 min 后再进行废弃处理。

GB 8538-2022《食品安全国家标准饮用天然矿泉水检验方法》