脑心浸液琼脂培养基:高营养微生物纯培养与链球菌检测用基础培养基

2026-06-22 16:17:34
逗点生物
简介

脑心浸液琼脂培养基:高营养微生物纯培养与链球菌检测用基础培养基

产品信息与用途

项目 内容
产品名称 脑心浸液琼脂培养基
英文名称 Brain Heart Infusion Agar
产品货号 GF1061
产品规格 250 g/瓶
保质期 未开封条件下三年
主要用途 用于营养要求较高微生物的培养及纯培养
特殊用途 用于矿泉水与城市供水中粪性链球菌滤膜法纯培养
参考标准 CJ/T 141-2018、GB 8538-2022、SN/T 2206.4-2009

配方组成及作用

使用时称取本品 53.5 g,加入蒸馏水或去离子水 1 L,加热搅拌至完全溶解后分装,于 121 ℃高压灭菌 15 min,备用。最终 pH 为 7.4±0.2(25 ℃)。

成分 用量 主要作用
牛脑浸出粉 10.0 g/L 提供维生素、氨基酸及生长因子,促进营养苛刻菌生长
牛心浸出粉 9.0 g/L 提供丰富有机氮源及微量营养物质
蛋白胨(胨蛋白胨) 10.0 g/L 提供可利用氮源与多肽,支持细菌快速生长
葡萄糖 2.0 g/L 提供可发酵碳源与能量来源
氯化钠 5.0 g/L 维持渗透压平衡,保证细胞生理稳定
磷酸氢二钠 2.5 g/L 缓冲体系成分,稳定培养基 pH
琼脂 15.0 g/L 凝固剂,使培养基形成稳定固体结构
最终 pH 7.4±0.2 适宜多数细菌及链球菌类生长环境

检验原理

脑心浸液琼脂的核心特点是“高营养支持型培养”。牛脑与牛心浸出物富含维生素、辅酶及多种生长因子,可满足部分对营养要求较高或受损菌的恢复生长需求。蛋白胨提供基础氮源与肽类物质,促进细胞结构合成与代谢活动。

葡萄糖作为易利用碳源,为细菌提供快速能量来源;氯化钠维持渗透压稳定,避免细胞因渗透压变化受到抑制;磷酸氢二钠则通过缓冲作用维持培养环境稳定pH,避免代谢产酸导致生长抑制。

由于其营养丰富,该培养基不具备明显选择性,而是以“促进恢复生长与扩大培养”为主要功能。在水质检验中,常用于滤膜法分离后的菌落纯化培养,特别是粪性链球菌(肠球菌)在选择性培养基上形成可疑菌落后的确认与纯培养步骤。

质量控制

质控菌株接种后于 35~37 ℃培养 24 h,观察生长情况与菌落特征。

质控指标 质控菌株及编号 质控评定标准
生长率 粪肠球菌 ATCC 29212 PR≥0.9,形成典型灰白色菌落
生长表现 乙型溶血性链球菌 CMCC(B) 32210 生长良好,可见溶血现象(视培养条件而定)
生长表现 大肠埃希氏菌 ATCC 25922 生长良好,菌落典型

其中PR表示生长恢复率,用于评价培养基对目标菌的支持能力。理想情况下,BHI琼脂应对多种菌株表现出良好的普适生长支持能力,而非强选择性抑制。

操作要点与应用说明

在实际应用中,BHI琼脂通常作为“纯培养与复壮培养基”使用,而非初筛或选择性分离培养基。在滤膜法或选择性培养基上获得的可疑菌落,可转接至BHI琼脂进行纯化培养,以获得稳定生长的单菌落,为后续生化鉴定或分子检测提供可靠菌体来源。

配制过程中应确保完全溶解并充分灭菌,以避免浑浊或颗粒影响菌落观察。灭菌后应避免过度高温长时间放置,以防止糖类焦化或营养成分降解。

培养过程中,由于该培养基营养丰富,部分杂菌也可能良好生长,因此在纯培养阶段需结合前期选择性培养结果进行综合判断。

贮存与安全注意事项

干粉培养基应密封保存于阴凉、干燥、避光环境中,避免吸潮结块及营养成分氧化降解。开封后应尽快使用并保持瓶口密封。

操作过程中应注意防止粉尘吸入,建议佩戴口罩并在通风良好环境中称量。本产品仅用于实验室微生物检测,不得用于临床诊断或人体相关用途。

实验结束后的培养物及污染材料应按生物安全规范处理,通常采用 121 ℃高压灭菌 30 min 后再进行废弃处置。

参考文献

CJ/T 141-2018《城镇供水水质检验标准》
GB 8538-2022《食品安全国家标准 饮用天然矿泉水检验方法》
SN/T 2206.4-2009《化妆品微生物检验方法 第4部分:链球菌》