胰蛋白胨大豆肉汤(TSB):通用细菌培养与改良选择性增菌培养基

2026-06-22 16:20:36
逗点生物
简介

胰蛋白胨大豆肉汤(TSB):通用细菌培养与改良选择性增菌培养基

产品信息与用途

项目 内容
产品名称 胰蛋白胨大豆肉汤(TSB)
英文名称 Trypticase Soy Broth (TSB)
产品货号 GF1064
产品规格 250 g/瓶
保质期 未开封条件下三年
主要用途 细菌培养、消毒剂效果测试、溶血性链球菌增菌培养
标准参考 GB 4789.11-2014

配方组成及作用

使用时称取本品 30.0 g,加入蒸馏水或去离子水 1 L,加热搅拌至完全溶解后分装,于 121 ℃高压灭菌 15 min,备用。

如需配制改良胰蛋白胨大豆肉汤(mTSB),应待培养基冷却至 50 ℃以下后,每 225 mL 培养基加入配套试剂 TJ053 与 TJ054 各 1 支,混匀后使用。

成分 用量 主要作用
胰蛋白胨 17.0 g/L 提供高质量氮源、肽类及氨基酸,促进细菌快速生长
植物蛋白胨 3.0 g/L 补充氮源与维生素,提高营养均衡性
氯化钠 5.0 g/L 维持渗透压稳定,保证细胞生理状态
磷酸氢二钾 2.5 g/L 缓冲体系成分,稳定培养基pH
葡萄糖 2.5 g/L 提供易利用碳源与能量来源
最终 pH 7.3±0.2 适宜多数细菌生长的中性环境

检验原理

TSB属于典型的非选择性通用培养基,其核心作用是提供均衡且丰富的营养环境,使多种细菌能够快速恢复生长并达到较高菌体密度。

胰蛋白胨与植物蛋白胨提供蛋白质水解产物、氨基酸及生长因子,是细菌合成蛋白质和核酸的重要基础;葡萄糖作为可利用碳源,为细胞代谢提供能量;氯化钠维持渗透压稳定,避免细胞因环境变化受到抑制;磷酸氢二钾作为缓冲体系维持pH稳定,防止代谢产酸影响生长。

在改良体系mTSB中,通过添加选择性抑制或促进因子,可使培养基在保持基础营养支持能力的同时,具备一定目标菌富集能力。例如在溶血性链球菌检测中,可实现对目标菌的增强复苏,同时抑制部分背景菌生长,从而提高检出率。

质量控制

1. TSB基础培养基质控(35~37 ℃,18~24 h)

质控指标 质控菌株及编号 质控评定标准
生长率 大肠埃希氏菌 CMCC(B) 43201 浑浊度2或菌体均匀生长
生长率 金黄色葡萄球菌 CMCC(B) 26305 浑浊度2或菌体均匀生长
生长率 枯草芽孢杆菌 CMCC(B) 63542 浑浊度2或明显混浊生长

该结果表明TSB对革兰氏阴性菌与阳性菌均具有良好的普适支持能力。

2. mTSB改良培养基质控(35~37 ℃,18~24 h)

质控指标 质控菌株及编号 质控评定标准
生长率 乙型溶血性链球菌 CMCC(B) 32210 在哥伦比亚CNA血琼脂上形成>10 CFU,典型β溶血,菌落灰白、圆形、表面凸起
选择性 大肠埃希氏菌 CMCC(B) 43201 在TSA上生长<100 CFU

该结果说明mTSB在保证目标菌恢复生长能力的同时,对背景菌具有一定抑制作用,从而提高目标菌检出效率。

操作要点与应用说明

在TSB配制过程中,应确保完全溶解,避免蛋白胨或葡萄糖局部沉淀影响营养均一性。灭菌条件需严格控制为 121 ℃、15 min,避免过度加热导致糖类焦化或营养成分破坏。

mTSB体系中添加的配套试剂必须在培养基冷却至 50 ℃以下加入,以避免热敏性成分失活或抑制效果下降。混匀应充分,保证选择性因子均匀分布。

在消毒剂效果测试中,TSB常用于恢复受损菌体,使其恢复代谢活性,从而准确评估消毒处理后的存活情况。在溶血性链球菌检测中,mTSB则用于增强目标菌富集,提高检出灵敏度。

贮存与安全注意事项

干粉培养基应密封保存于阴凉、干燥、避光环境中,避免吸潮结块或成分降解。开封后应尽快使用并保持瓶口密封。

操作过程中应注意粉尘吸入风险,建议佩戴口罩并在通风良好环境中操作。本产品仅用于实验室微生物检测,不得用于临床诊断或人体相关用途。

实验结束后的所有培养物及污染材料应按生物安全规范处理,一般采用 121 ℃高压灭菌 30 min 后再进行废弃处置。

参考文献

GB 4789.11-2014《食品安全国家标准 食品微生物学检验 β型溶血性链球菌检验》