肠道菌增菌肉汤:致泻大肠埃希氏菌与肠杆菌科选择性增菌培养基

2026-06-22 16:24:10
逗点生物
简介

肠道菌增菌肉汤:致泻大肠埃希氏菌与肠杆菌科选择性增菌培养基

产品信息与用途

项目 内容
产品名称 肠道菌增菌肉汤
英文名称 Enterobacteriaceae Enrichment Broth
产品货号 GF1068
产品规格 250 g/瓶
保质期 未开封条件下三年
主要用途 用于肠道菌及致泻大肠埃希氏菌选择性增菌培养
适用标准 GB/T 4789.6-2016

配方组成及作用

使用时称取本品 45.0 g,加入蒸馏水或去离子水 1 L,加热搅拌至完全溶解后分装,于 115 ℃高压灭菌 20 min,备用。最终 pH 为 7.2±0.2(25 ℃)。

成分 用量 主要作用
蛋白胨 10.0 g/L 提供氮源、氨基酸及基础生长营养
葡萄糖 5.0 g/L 提供可利用碳源与能量来源
牛胆盐 20.0 g/L 选择性抑制革兰氏阳性菌及部分非肠道菌
磷酸氢二钠 8.0 g/L 缓冲体系成分,维持pH稳定
磷酸二氢钾 2.0 g/L 与磷酸氢二钠共同构成缓冲系统
煌绿 0.015 g/L 强选择性抑菌剂,抑制非肠杆菌科细菌
最终 pH 7.2±0.2 提供适宜肠杆菌科生长环境

检验原理

肠道菌增菌肉汤的核心机制是“选择性抑制 + 营养富集”。蛋白胨提供基础氮源与生长因子,支持肠杆菌科细菌快速恢复生长;葡萄糖作为易利用碳源促进代谢与增殖。

牛胆盐对革兰氏阳性菌具有明显抑制作用,同时可模拟肠道胆汁环境,使肠道来源细菌更易适应生长;煌绿作为强选择性抑菌剂,可进一步抑制非肠杆菌科及部分杂菌,提高目标菌检出率。

磷酸盐缓冲体系维持培养基pH稳定,避免代谢产酸导致环境偏移,从而保证目标菌在富集过程中的稳定增殖。

在致泻大肠埃希氏菌检测中,该培养基通过选择性增菌作用,提高低污染水平样品中目标菌的恢复概率,为后续分离培养(如MAC、VRBA等)提供高浓度菌液基础。

质量控制

质控菌株接种后于 42 ℃培养 18 h,观察增菌效果及后续平板表现。

质控菌株及编号 特征性反应
大肠埃希氏菌 CMCC(B) 44102 肉汤浑浊;接种MAC后>10 CFU,菌落鲜桃红色或粉红色,可见胆酸沉淀
铜绿假单胞菌 CMCC(B) 10104 肉汤浑浊;MAC上>10 CFU,菌落无色至浅粉红色、透明或半透明
金黄色葡萄球菌 CMCC(B) 26003 肉汤澄清;TSA上<100 CFU,生长受明显抑制

该结果表明该培养基对肠杆菌科具有良好富集能力,同时对革兰氏阳性菌具有显著抑制作用,并可在一定程度上限制非目标革兰氏阴性菌的干扰。

使用要点与操作说明

在实际操作中,应严格控制灭菌条件为 115 ℃、20 min,避免高温过度灭菌导致煌绿等选择性成分失活,从而降低选择性效果。

培养时建议控制温度在 42 ℃条件下进行,这是肠杆菌科及致泻性大肠埃希氏菌的典型选择性增菌温度,有助于提高目标菌相对优势。

由于该培养基选择性较强,不适用于纯培养或形态观察,通常需结合后续选择性平板(如MAC、VRBA等)进行分离与鉴定。若肉汤出现明显混浊,通常提示存在肠杆菌科或相关革兰氏阴性菌增殖,但仍需进一步确认。

贮存与安全注意事项

干粉培养基应密封保存于阴凉、干燥、避光环境中,防止吸潮与成分降解。开封后应尽快使用,并保持瓶口密封。

操作过程中应避免粉尘吸入,建议佩戴口罩并在通风良好环境中操作。本产品仅用于实验室微生物检测,不得用于临床诊断或人体用途。

实验结束后的所有培养物及污染材料应按生物安全规范处理,一般采用 121 ℃高压灭菌 30 min 后再进行废弃处置。

参考文献

GB/T 4789.6-2016《食品安全国家标准 食品微生物学检验 致泻大肠埃希氏菌检验》