3%氯化钠三糖铁琼脂（TSI）：副溶血性弧菌生化鉴别培养基
- 2026-06-22 16:28:34
- 逗点生物
3%氯化钠三糖铁琼脂（TSI）：副溶血性弧菌生化鉴别培养基
产品信息与用途
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 产品名称 | 3%氯化钠三糖铁琼脂 |
| 英文名称 | 3% Sodium Chloride Triple Sugar Iron Agar |
| 产品货号 | GF1072 |
| 产品规格 | 250 g/瓶 |
| 保质期 | 未开封条件下三年 |
| 主要用途 | 副溶血性弧菌生化反应试验 |
| 适用标准 | GB 4789.7-2013 |
配方组成及作用
使用时称取本品 89.5 g，加入蒸馏水或去离子水 1 L，加热搅拌至完全溶解后分装试管，于 121 ℃高压灭菌 15 min，制成高层斜面备用。最终 pH 为 7.4±0.2（25 ℃）。
| 成分 | 用量 | 主要作用 |
|---|---|---|
| 蛋白胨 | 15.0 g/L | 提供基础氮源、氨基酸及生长因子 |
| 胨蛋白胨 | 5.0 g/L | 补充肽类营养物质，增强细菌生长能力 |
| 牛肉膏 | 3.0 g/L | 提供维生素、矿物质及有机氮源 |
| 酵母浸膏 | 3.0 g/L | 提供维生素及生长因子 |
| 氯化钠 | 30.0 g/L | 提供高盐环境，满足弧菌嗜盐性需求 |
| 乳糖 | 10.0 g/L | 可发酵二糖，用于产酸反应判定 |
| 蔗糖 | 10.0 g/L | 可发酵二糖，扩展糖发酵谱 |
| 葡萄糖 | 1.0 g/L | 易发酵单糖，用于快速产酸检测 |
| 硫代硫酸钠 | 0.3 g/L | 提供硫源，用于H₂S产生检测 |
| 硫酸亚铁 | 0.2 g/L | 与H₂S反应生成黑色硫化铁沉淀 |
| 苯酚红 | 0.024 g/L | pH指示剂，酸性变黄、碱性变红 |
| 琼脂 | 12.0 g/L | 凝固剂，形成高层斜面结构 |
| 最终 pH | 7.4±0.2 | 适宜弧菌生化反应环境 |
检验原理
3%氯化钠三糖铁琼脂的核心原理是“三糖发酵 + H₂S产生 + 斜面/底层反应分层判定”。
蛋白胨、牛肉膏及酵母浸膏提供丰富的基础营养，使副溶血性弧菌等嗜盐菌能够在高盐环境中正常生长。30 g/L氯化钠模拟海洋环境，保证弧菌生理活性，同时抑制非嗜盐菌。
乳糖、蔗糖与葡萄糖分别作为三种不同发酵底物，通过细菌代谢产酸使培养基pH下降，苯酚红由红色变为黄色；若不发酵则维持碱性呈红色。由于培养基采用斜面结构，上部为好氧环境、底部为厌氧环境，因此可分别观察斜面与底部反应差异。
硫代硫酸钠在部分细菌作用下可被还原生成H₂S，与硫酸亚铁反应生成黑色硫化铁沉淀，用于检测产硫化氢能力，是弧菌鉴别的重要辅助指标。
通过综合观察“斜面颜色 + 底部颜色 + 是否产气 + 是否产H₂S”，可对弧菌进行初步生化鉴别。
质量控制
质控菌株接种后于 35～37 ℃培养 24 h，观察生化反应结果。
| 质控菌株及编号 | 特征性反应 |
|---|---|
| 副溶血性弧菌 ATCC 17802 | 生长良好，斜面变红，底部变黄 |
| 溶藻弧菌 ATCC 33787 | 生长良好，斜面和底部均变黄 |
该结果表明该培养基能够有效区分不同弧菌的糖发酵特征，为副溶血性弧菌的初步生化鉴定提供依据。
使用要点与操作说明
在配制过程中应充分加热溶解各组分，并按要求分装制备高层斜面结构，以保证好氧与厌氧区域分层明显，这是TSI反应判读的关键基础。
灭菌条件为 121 ℃、15 min，需避免过度灭菌导致糖类焦化或指示剂失效。制备完成后应检查斜面完整性及是否存在气泡或裂纹。
接种后应注意采用穿刺底部并划线斜面的标准接种方式，以确保底层与斜面反应均可观察。培养时间通常为 24 h，过长培养可能导致颜色回变或结果失真。
在副溶血性弧菌鉴定中，应结合氧化酶试验、嗜盐性及选择性平板结果综合判断，TSI结果仅作为生化鉴别的一部分依据。
贮存与安全注意事项
干粉培养基应密封保存于阴凉、干燥、避光环境中，防止吸潮结块及成分降解。开封后应尽快使用并保持瓶口密封。
操作过程中应避免粉尘吸入，建议佩戴口罩并在通风良好环境中操作。本产品仅用于实验室微生物检测，不得用于临床诊断或人体用途。
实验结束后的所有培养物及污染材料应按生物安全规范处理，一般采用 121 ℃高压灭菌 30 min 后再进行废弃处置。
参考文献
GB 4789.7-2013《食品安全国家标准 副溶血性弧菌检验》
