DG18（氯硝胺18%甘油）琼脂基础：蜂蜜中嗜渗酵母计数专用培养基
- 2026-06-22 16:32:09
- 逗点生物
DG18（氯硝胺18%甘油）琼脂基础：蜂蜜中嗜渗酵母计数专用培养基
产品信息与用途
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 产品名称 | 氯硝胺18%甘油（DG18）琼脂基础 |
| 英文名称 | Dichloran-Glycerol (DG18) Agar Base |
| 产品货号 | GF1074 |
| 产品规格 | 250 g/瓶 |
| 保质期 | 未开封条件下三年 |
| 主要用途 | 蜂蜜中嗜渗酵母计数 |
| 适用标准 | GB 14963-2011 |
配方组成及作用
使用时称取本品 31.5 g，加入蒸馏水或去离子水 1 L，并加入无水甘油 200 g，充分搅拌加热至完全溶解后，于 121 ℃高压灭菌 15 min。冷却至约 50 ℃后，每 200 mL 基础培养基加入配套试剂 TJ070，混匀后倾注平板备用。最终 pH 为 5.6±0.2（25 ℃）。
| 成分 | 用量 | 主要作用 |
|---|---|---|
| 酪蛋白胨 | 5.0 g/L | 提供基础氮源、氨基酸及生长因子 |
| 葡萄糖 | 10.0 g/L | 提供可利用碳源，支持酵母生长 |
| 磷酸二氢钾 | 1.0 g/L | 缓冲体系成分，维持pH稳定 |
| 硫酸镁 | 0.5 g/L | 提供微量元素，促进酶系统活性 |
| 氯硝胺 | 0.002 g/L | 抑制菌落扩展性霉菌生长，使菌落清晰可计数 |
| 琼脂 | 15.0 g/L | 凝固剂，形成固体培养基 |
| 甘油（外加） | 200 g/L（约18%） | 降低水活度，模拟高渗环境，选择性促进嗜渗酵母生长 |
| 最终 pH | 5.6±0.2 | 适合酵母生长的弱酸性环境 |
检验原理
DG18培养基的设计核心是模拟蜂蜜等高糖食品的低水活度环境，通过18%甘油显著降低水活度，从而抑制多数细菌及非嗜渗微生物的生长，仅允许适应高渗环境的酵母和部分霉菌生长。
氯硝胺（dichloran）可有效抑制霉菌菌丝过度扩展，使霉菌菌落保持紧凑形态，便于计数与形态观察。酪蛋白胨与葡萄糖提供基本营养来源，支持目标酵母菌生长；磷酸盐缓冲体系维持酸性稳定环境；硫酸镁提供必要微量元素以维持代谢活性。
在蜂蜜检测中，该培养基主要用于嗜渗酵母的定量分析，通过计数酵母菌落数量评估蜂蜜在储存及生产过程中的卫生状况与发酵风险。
质量控制
质控菌株接种后于 25±1 ℃需氧培养 48～168 h，观察生长情况及菌落特征。
| 质控指标 | 质控菌株及编号 | 质控评定标准 |
|---|---|---|
| 生长率 | 酵母菌 ATCC 18790 | PR≥0.7，形成白色酵母菌落 |
| 生长率 | 白色念珠菌 CMCC(F) 98001 | PR≥0.7，白色或奶油色菌落 |
| 选择性 | 大肠埃希氏菌 ATCC 25922 | G≤1，基本不生长 |
其中PR表示生长恢复率，用于评价目标酵母在高渗环境中的适应与增殖能力；G≤1表示非目标细菌受到显著抑制。
使用要点与操作说明
在配制过程中，甘油必须在灭菌前充分混匀，以确保水活度均一，这是DG18体系选择性的关键参数。灭菌后应在50 ℃左右加入配套选择性试剂（TJ070），避免高温导致活性成分失效。
培养温度应控制在 25±1 ℃，培养时间通常为 48～168 h。由于嗜渗酵母生长较慢，需足够培养时间以保证检出率。菌落计数时应选择形态清晰、边界完整的菌落进行统计。
该培养基不适用于快速增菌或细菌培养，其主要功能为低水活度食品中酵母及霉菌的选择性分离与计数。
贮存与安全注意事项
干粉培养基应密封保存于阴凉、干燥、避光环境中，防止吸潮及成分降解。开封后应尽快使用，并保持瓶口密封。
操作过程中应避免粉尘吸入，建议佩戴口罩并在通风良好环境下操作。本产品仅用于实验室微生物检测，不得用于临床诊断或人体用途。
实验结束后的所有培养物及污染材料应按生物安全规范处理，一般采用 121 ℃高压灭菌 30 min 后再进行废弃处置。
参考文献
GB 14963-2011《食品安全国家标准 蜂蜜》
