TSC琼脂基础（胰胨-亚硫酸盐-环丝氨酸）：产气荚膜梭菌平板计数专用培养基

产品信息与用途

配方组成及作用

使用时称取本品 42.0 g，加入蒸馏水或去离子水 1 L，加热搅拌至完全溶解后分装三角瓶，于 121 ℃高压灭菌 15 min。冷却至约 50 ℃后，每 100 mL 基础培养基加入配套试剂 TJ027，混匀后倾注无菌平皿备用。最终 pH 为 7.6±0.2（25 ℃）。

检验原理

TSC培养基的核心机制是“选择性抑制 + 硫化氢显色反应”。

胰胨、大豆胨和酵母粉提供丰富的氮源、维生素及生长因子，使产气荚膜梭菌能够在厌氧条件下快速生长并形成典型菌落。D-环丝氨酸通过干扰细胞壁合成，选择性抑制多数非梭菌革兰氏阳性菌，从而提高目标菌检出率。

焦亚硫酸钠在厌氧代谢过程中参与硫还原反应，产气荚膜梭菌可将其还原为硫化氢（H₂S），并与柠檬酸铁铵中的铁离子反应生成黑色硫化铁沉淀，使菌落呈现典型黑色中心，这是其最重要的鉴别特征。

因此，在该培养基上，产气荚膜梭菌通常表现为黑色或黑心菌落，而非目标菌则受到明显抑制或不生长。

质量控制

质控菌株接种后于 35～37 ℃厌氧培养 20～24 h，观察生长及菌落特征。

其中PR表示生长恢复率，用于评价目标菌在选择性环境中的生长能力；G≤1表示非目标菌受到显著抑制。理想情况下，产气荚膜梭菌应形成典型黑色菌落，而艰难梭菌等非目标菌应基本不生长。

使用要点与操作说明

TSC培养基必须在严格厌氧条件下使用，这是产气荚膜梭菌生长与显色的必要条件。培养基在灭菌后应冷却至50 ℃左右再加入配套选择性试剂，以避免环丝氨酸等活性成分失效。

倾注平板时应保证培养基均匀分布，避免气泡影响厌氧环境建立。培养温度控制在 35～37 ℃，培养时间为 20～24 h，过长培养可能导致菌落扩散或背景干扰增加。

结果判读时应重点观察菌落颜色及中心黑色沉淀形成情况，并结合后续生化试验或分子检测进行确认，以提高结果准确性。

贮存与安全注意事项

干粉培养基应密封保存于阴凉、干燥、避光环境中，防止吸潮及成分降解。开封后应尽快使用，并保持瓶口密封。

操作过程中应避免粉尘吸入，建议佩戴口罩并在通风良好环境中操作。本产品仅用于实验室微生物检测，不得用于临床诊断或人体用途。

实验结束后的所有培养物及污染材料应按生物安全规范处理，一般采用 121 ℃高压灭菌 30 min 后再进行废弃处置。

参考文献

GB 4789.13-2012《食品安全国家标准 食品微生物学检验 产气荚膜梭菌检验》