MFC培养基:饮用水中粪大肠菌群滤膜法专用选择性培养基

2026-06-22 16:43:35
逗点生物
简介

MFC培养基:饮用水中粪大肠菌群滤膜法专用选择性培养基

产品信息与用途

项目 内容
产品名称 MFC培养基
英文名称 MFC Medium
产品货号 GF1081
产品规格 250 g/瓶
保质期 未开封条件下三年
主要用途 饮用水及水源水中粪大肠菌群滤膜法测定
适用标准 GB/T 5750.12-2023

配方组成及作用

使用时称取本品 52.3 g,加入蒸馏水或去离子水 1 L,加热搅拌至完全溶解后使用,不建议高压灭菌,冷却至约 50 ℃后倾注无菌平皿,待凝固备用。最终 pH 为 7.4±0.2(25 ℃)。

成分 用量 主要作用
胰胨 10.0 g/L 提供基础氮源及氨基酸
多胨 5.0 g/L 补充肽类营养物质
酵母膏粉 3.0 g/L 提供维生素及生长因子
氯化钠 5.0 g/L 维持渗透压稳定
乳糖 12.5 g/L 可发酵碳源,用于产酸反应
3号胆盐 1.5 g/L 选择性抑制革兰氏阳性菌及部分杂菌
玫红酸 0.1 g/L pH指示剂体系组成,参与菌落显色
苯胺蓝 0.2 g/L pH指示剂,与玫红酸协同形成颜色反应
琼脂 15.0 g/L 凝固剂,形成固体培养基
最终 pH 7.4±0.2 适宜肠道菌生长环境

检验原理

MFC培养基的检测原理基于“高温选择性 + 乳糖发酵显色 + 胆盐抑制体系”。

在44.5 ℃较高培养温度下,能够选择性促进粪源性大肠菌群(如大肠埃希氏菌)的生长,同时抑制非粪源性肠道菌及多数环境细菌。3号胆盐进一步增强选择性,抑制革兰氏阳性菌干扰。

乳糖作为主要可发酵碳源,被粪大肠菌群利用后产生酸性代谢产物,使pH下降。玫红酸与苯胺蓝组成的指示体系在酸性条件下发生颜色变化,使典型菌落呈现蓝黑色或深色特征。

由于部分非目标菌也可能在低程度下生长,因此需结合菌落形态、培养温度及滤膜背景综合判断。

质量控制

质控菌株接种后于 44.5 ℃培养 24 h,观察菌落生长及颜色特征。

指标 质控菌株及编号 标准值 特征性反应
生长率 大肠埃希氏菌 ATCC 25922 PR≥0.7 蓝黑色菌落
特异性 鼠伤寒沙门氏菌 ATCC 14028 红色或非典型菌落
选择性 金黄色葡萄球菌 ATCC 25923 G≤1 基本不生长

PR表示生长恢复率,用于评价目标菌在选择性条件下的生长能力;G≤1表示非目标菌受到有效抑制。

使用要点与操作说明

MFC培养基在配制过程中应避免高压灭菌,以防止胆盐与指示剂体系失效。应采用加热溶解后直接倾注的方法,并严格控制倾注温度在约50 ℃。

培养温度需精确控制在44.5 ℃,这是区分粪源性与非粪源性大肠菌群的关键条件。温度偏低可能导致选择性下降,偏高则可能抑制目标菌生长。

培养时间一般为24 h,过长时间培养可能导致颜色回变或背景干扰增加。菌落判读应重点关注蓝黑色典型菌落,并结合滤膜计数结果进行定量分析。

贮存与安全注意事项

干粉培养基应密封保存于阴凉、干燥、避光环境中,防止吸潮及成分变质。开封后应尽快使用,并保持瓶口密封。

操作过程中应避免粉尘吸入,建议佩戴口罩并在通风良好环境下操作。本产品仅用于实验室微生物检测,不得用于临床诊断或人体用途。

实验结束后的所有培养物及污染材料应按生物安全规范处理,一般采用 121 ℃高压灭菌 30 min 后再进行废弃处置。

参考文献

GB/T 5750.12-2023《生活饮用水标准检验方法 微生物指标》