双歧杆菌琼脂培养基（BBL）：用于食品中双歧杆菌计数与鉴定的厌氧培养基

产品信息与用途

配方组成及作用

培养基原理

双歧杆菌对营养和培养环境要求较高。蛋白胨和酵母膏粉为菌体生长提供基础氮源、维生素和生长因子；葡萄糖是双歧杆菌常用的发酵碳源，可支持菌体快速增殖和菌落形成；番茄浸粉、肝粉和吐温-80能够补充多种生长促进物质，使部分生长较慢或营养要求较高的双歧杆菌获得更好的恢复和培养效果。

半胱氨酸是该类培养基中的关键成分之一。双歧杆菌对氧较敏感，培养基中加入半胱氨酸可降低氧化还原电位，改善厌氧环境，减轻氧化应激对菌体的影响。氯化钠用于维持渗透压，琼脂用于形成固体培养基，使菌落能够在平板上独立形成，便于计数和挑取。

需要注意的是，BBL琼脂主要用于双歧杆菌计数和培养观察。实际鉴定时，仍应结合革兰氏染色、菌体形态、厌氧生长特性、生化反应或分子生物学方法综合确认。

使用方法

称取本品68.3 g，加入蒸馏水或去离子水1 L，再加入吐温-80 1 mL，搅拌加热煮沸至完全溶解。分装三角瓶后，于121℃高压灭菌15～20 min，冷却至适宜温度后倾注平板或按检测方法要求使用。

配制时应确保吐温-80充分分散，避免局部油状聚集影响培养基均匀性。由于培养基中含有葡萄糖、番茄浸粉、肝粉和半胱氨酸等热敏或易发生颜色变化的成分，灭菌时间不宜无故延长。灭菌后培养基颜色、凝固状态和pH应保持正常，若出现异常沉淀、污染、凝固不良或明显焦糖化现象，应停止使用。

质量控制

按标签方法制备培养基后，接种质控菌株，于35～37℃厌氧培养48～72 h，观察菌落生长情况。

质量控制中，PR≥0.7表示该培养基应能较好支持目标双歧杆菌生长。若质控菌株生长率偏低，应重点检查厌氧培养条件、培养时间、培养温度、吐温-80添加量、半胱氨酸有效性、培养基pH、灭菌时间以及菌种活性。双歧杆菌对氧较敏感，厌氧系统不充分、平板暴露空气时间过长或培养容器密封不良，均可能导致菌落数量减少或菌落发育不典型。

操作与储存注意事项

本品不得用于临床检验。干粉培养基称量时应注意粉尘防护，建议佩戴口罩，避免吸入粉尘引起呼吸道不适。干粉使用后应立即密封，置于避光、干燥处保存，防止吸潮结块。未开封产品在规定条件下保质期为三年；开封后保质时间会受环境湿度、密封状态和取用频次影响，应根据实际保存情况评估。

检测结束后的带菌平板、吸头、接种环及其他污染物，应按实验室生物安全要求处理。带菌物品建议置于121℃高压灭菌30 min后再进行废弃处理。