克罗诺杆菌筛选肉汤基础：用于克罗诺杆菌选择性增菌的鉴别性培养基

产品信息与用途

配方组成及作用

检验原理

克罗诺杆菌筛选肉汤的核心原理是“营养增菌、抗生素选择、糖发酵显色”。动物组织酶消化物和牛肉浸粉为细菌提供基础营养，使经前处理或受损的目标菌得到恢复和增殖。蔗糖作为主要可发酵糖类，若被目标菌利用并产生酸性代谢产物，培养基pH下降，溴甲酚紫由紫色或紫蓝色转为黄色。

万古霉素属于抑制革兰氏阳性菌较强的抗生素，对许多革兰氏阳性伴生菌有抑制作用。由于克罗诺杆菌属于革兰氏阴性杆菌，对万古霉素通常具有相对耐受性，因此在加入万古霉素后，培养基可减少部分背景菌干扰，使克罗诺杆菌获得更好的选择性增菌条件。

需要注意的是，筛选肉汤出现浑浊并变黄，提示可能存在可利用蔗糖产酸的目标菌或相近菌群，但不能单独作为克罗诺杆菌确证依据。后续仍应结合选择性分离平板、典型菌落观察、生化鉴定或分子方法进行确认。

使用方法

称取本品28.04 g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解。121℃高压灭菌15 min。灭菌后冷却至约50℃时，每100 mL培养基中加入万古霉素1 mg，混匀后分装备用。

按上述添加量计算，万古霉素终浓度为10 mg/L。万古霉素不宜与基础培养基一起高压灭菌，应待培养基灭菌并冷却后无菌加入，以免高温影响其抑菌活性。加入后应充分混匀，避免抗生素分布不均造成选择性不稳定。

质量控制

按标签用法制备培养基，并加入规定浓度万古霉素后，接种质控菌株，于36±1℃培养18～24 h，观察肉汤浑浊度和颜色变化。

其中，阪崎克罗诺杆菌ATCC 29544应表现为良好生长并使培养基变黄，说明培养基营养支持能力和蔗糖产酸显色系统正常。大肠埃希氏菌ATCC 25922可作为非目标革兰氏阴性对照，预期可生长但不发生黄色反应，用于观察鉴别性。金黄色葡萄球菌ATCC 25923应被抑制，肉汤保持澄清，用于评价万古霉素选择性是否有效。

若目标菌不生长或不变黄，应重点检查培养温度、培养时间、菌株活性、培养基pH、蔗糖含量及指示剂状态。若金黄色葡萄球菌生长明显，则需检查万古霉素是否漏加、添加浓度是否不足、抗生素是否失效或加入时温度过高导致活性下降。

操作与储存注意事项

本品不得用于临床检验。干粉培养基称量时应注意粉尘防护，建议佩戴口罩，避免吸入粉尘引起呼吸道不适。干粉培养基使用后应立即密封，置于避光、干燥处保存，防止吸潮结块。未开封产品在规定条件下保质期为三年；开封后保质时间会受环境湿度、密封状态和取用频次影响，应根据实际保存条件评估。

配制后的培养基应注意无菌操作，特别是在加入万古霉素时，应避免二次污染。若培养基出现异常浑浊、沉淀、颜色异常或pH明显偏移，不宜继续使用。检测结束后的带菌培养物、吸头、试管及其他污染物，应按实验室生物安全要求处理，建议经121℃高压灭菌30 min后再废弃。