Skirrow血琼脂基础：用于弯曲菌选择性分离培养的含血培养基

一、产品用途与基本信息

二、基础配方组成、用量及作用

三、配套添加成分及作用

Skirrow血琼脂基础单独使用时不具备完整选择性。按产品说明，基础培养基灭菌后需在约50 ℃时加入配套试剂TJ025、无菌脱纤维羊血和过滤除菌的FBP溶液。添加剂的加入温度不宜过高，否则可能影响血液成分和抗菌成分稳定性；温度过低则培养基易提前凝固，影响倒平板操作。

四、FBP溶液配制与作用

FBP是弯曲菌培养中常用的保护体系，通常由硫酸亚铁、焦亚硫酸钠和丙酮酸钠组成。三者共同作用，可降低培养环境中的氧化压力，改善弯曲菌对氧化损伤的耐受性。由于FBP中部分成分受热后稳定性可能下降，通常采用过滤除菌，而不是高压灭菌。

注：FBP储备液配制后应在无菌条件下保存，并根据实验室验证期限使用。若出现明显变色、沉淀或污染，应重新配制。

五、检验原理

Skirrow血琼脂的核心是“营养支持 + 血液保护 + FBP抗氧化 + 选择性抑菌”。蛋白胨、胰酪蛋白胨和酵母浸粉为弯曲菌提供氨基酸、短肽、维生素和生长因子，使目标菌能够在微需氧环境下恢复活性并形成菌落。氯化钠维持渗透压稳定，琼脂形成固体培养基，便于观察菌落形态。

羊血可改善弯曲菌的生长环境，并对部分有害代谢物或氧化性物质起到缓冲作用。FBP溶液中的丙酮酸钠、焦亚硫酸钠和硫酸亚铁进一步减轻氧化应激，有利于受损弯曲菌复苏。选择性方面，配套试剂中的抗菌成分可抑制部分革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌及真菌，减少复杂样品中伴随菌的覆盖。需要注意的是，Skirrow血琼脂属于分离培养基，不能单独作为最终确认依据，疑似菌落仍需结合形态、生化、质谱或分子方法进行确认。

六、使用方法

称取本品42.5 g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，按实验需要分装后，于121 ℃高压灭菌15 min。灭菌结束后冷却至约50 ℃，每100 mL基础培养基加入1支配套试剂TJ025、5 mL无菌脱纤维羊血和1 mL过滤除菌的FBP溶液，充分混匀后倾注无菌平板，凝固后备用。

FBP溶液配制方法为：称取硫酸亚铁2.5 g、焦亚硫酸钠2.5 g、丙酮酸钠2.5 g，溶解于100 mL蒸馏水中，经0.22 μm滤膜过滤除菌后使用。加入FBP和羊血时应注意无菌操作，避免剧烈振荡产生过多气泡。倒平板前应充分混匀，使血液和添加剂分布均匀；平板凝固后应避免过度干燥和明显冷凝水，以免影响弯曲菌沿线扩散生长特征。

七、质量控制

八、结果观察与常见问题

空肠弯曲菌在Skirrow血琼脂上通常表现为灰色、湿润、有光泽、扁平的菌落，部分菌落可沿接种线扩散生长，边缘不规则。由于弯曲菌生长对气氛要求较高，若目标菌生长弱或不生长，应优先检查微需氧环境、培养温度、培养时间、菌株活性、FBP溶液质量和血液添加情况。

若平板杂菌较多，可能与选择性添加剂失效、加入量不足、配制后保存时间过长、样品背景菌过高或培养条件不当有关。若平板颜色异常、血液凝块较多或表面水分过多，应检查培养基冷却温度、血液加入温度、混匀方式和倒平板工艺。含血培养基对制备条件较敏感，建议按实验室验证方法控制平板厚度、干燥时间和保存期限。

九、贮存、废物处理与注意事项

本品不得用于临床检验。干粉培养基使用后应立即密封，置于避光、干燥处保存，避免吸潮、结块和性能下降。称量时应注意粉尘防护，建议佩戴口罩并在通风良好的环境中操作。未开封产品在规定条件下保质期为三年；开封后受储存湿度、温度和使用频次影响，保质时间可能缩短。

配制后的含血、含选择性添加剂平板应按实验室验证条件保存，并尽量在规定期限内使用。检测后的带菌培养物、平板和接触样品的耗材，应置于121 ℃高压灭菌30 min后再按实验室生物安全要求处理。

参考标准与资料

GB 4789.9《食品安全国家标准 食品微生物学检验 空肠弯曲菌和结肠弯曲菌检验》。

相关SN食品微生物检验方法中弯曲菌分离培养要求。