改良磷酸盐缓冲液（PSB）：用于小肠结肠炎耶尔森氏菌增菌培养的选择性缓冲体系

一、产品用途与基本信息

二、配方组成、用量及作用

三、检验原理

改良磷酸盐缓冲液的核心作用是为小肠结肠炎耶尔森氏菌提供相对稳定、温和并带有一定选择性的增菌环境。磷酸氢二钠和磷酸二氢钠组成缓冲体系，可稳定培养基pH，降低样品本身酸碱差异对目标菌复苏的影响。氯化钠用于维持渗透压，使菌体在增菌过程中处于相对稳定的生理环境。

山梨醇是培养基中的主要可利用碳源和能量来源，有助于目标菌在增菌阶段恢复活性并逐步增殖。需要注意的是，山梨醇不提供氮源，原资料中“山梨醇提供碳氮源”的说法不够准确，建议修正为“山梨醇提供碳源和能量来源”。3号胆盐具有选择性抑制作用，可限制部分革兰氏阳性菌和胆盐敏感菌群的生长，从而降低样品背景菌对目标菌增菌的干扰。

由于PSB营养体系相对简单，它的作用重点不是让目标菌快速大量增殖，而是在一定选择压力下维持并富集小肠结肠炎耶尔森氏菌。完成增菌后，应转种至改良Y平板等选择性分离培养基，观察典型菌落，并进一步开展确认试验。

四、使用方法

称取本品36.0 g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，按实验需要分装后，于121 ℃高压灭菌15 min。灭菌后冷却备用，并按GB 4789.8或实验室验证方法进行样品接种、增菌培养和后续分离。

配制时应保证干粉完全溶解，避免局部盐类或胆盐未充分分散影响培养基均一性。灭菌时间不宜随意延长，以免山梨醇受热变化或培养基颜色、pH发生偏移。培养基冷却后应检查外观和pH，如出现明显沉淀、异常浑浊、颜色异常或pH超出范围，应结合质控结果判断是否可用。

五、质量控制

六、结果观察与应用提示

PSB为液体增菌培养基，培养后不能仅凭肉汤是否浑浊判断小肠结肠炎耶尔森氏菌是否阳性。样品中其他耐胆盐或适应该培养条件的细菌也可能生长，因此增菌液需进一步转种至改良Y平板等选择性培养基。小肠结肠炎耶尔森氏菌在改良Y平板上的典型菌落通常为圆形、无色透明、不黏稠，但最终结果仍需结合后续鉴定确认。

若目标菌增菌效果不佳，应重点检查培养温度、培养时间、培养基pH、胆盐浓度、干粉保存状态、样品前处理以及菌株活性。小肠结肠炎耶尔森氏菌对温度较敏感，培养温度偏高或偏低都可能影响目标菌恢复和增殖。若选择性不足、杂菌过多，应检查胆盐是否失效、培养基是否放置过久、样品背景菌是否过高，以及后续分离平板选择性是否正常。

原资料中提到“对比实验结果”，但未提供具体数据或图片，因此本文不展开描述。实际产品宣传或技术资料中如需展示对比实验，应注明实验条件、样品类型、接种量、培养温度、培养时间和评价方法，以便结果具有可比性。

七、与改良Y平板的配合使用

在小肠结肠炎耶尔森氏菌检测流程中，PSB主要承担增菌富集作用，而改良Y平板等分离培养基承担菌落分离和初步筛选作用。PSB中的胆盐和山梨醇帮助在增菌阶段提高目标菌相对比例；转种分离平板后，可通过菌落形态进一步筛选疑似菌。两者结合使用，能够提高复杂食品样品中目标菌的检出机会。

需要强调的是，PSB不是显色培养基，也不是鉴定培养基。其检测意义主要体现在样品前期增菌环节，不能替代后续分离、纯化和确认试验。

八、贮存与注意事项

本品不得用于临床检验。干粉培养基使用后应立即密封，置于避光、干燥处保存，避免吸潮、结块和性能下降。称量时应注意粉尘防护，建议佩戴口罩并在通风良好的环境中操作。未开封产品在规定条件下保质期为三年；开封后受储存湿度、温度和使用频次影响，保质时间可能缩短。

配制后的培养基应按实验室验证条件保存，并尽量在规定期限内使用。检测后的带菌培养物、增菌液、平板和接触样品的耗材，应经高压灭菌后再按实验室生物安全要求处理。

参考标准与资料

GB 4789.8-2016《食品安全国家标准 食品微生物学检验 小肠结肠炎耶尔森氏菌检验》。

相关食品微生物检验方法中小肠结肠炎耶尔森氏菌增菌、分离和确认要求。