葡萄糖肉浸液肉汤：用于β型溶血性链球菌增菌培养的基础营养肉汤

一、产品用途与基本信息

二、配方组成、用量及作用

三、培养基原理

葡萄糖肉浸液肉汤的核心是“营养补充 + 能量供给 + 缓冲保护”。蛋白胨和牛肉粉为细菌提供氨基酸、短肽、矿物质和生长因子，是链球菌生长的基础营养来源。葡萄糖作为易利用糖类，可为菌体早期增殖提供能量，有利于目标菌在增菌阶段快速恢复和繁殖。

由于链球菌可利用葡萄糖产生酸性代谢产物，培养过程中pH可能下降。磷酸氢二钾具有一定缓冲能力，可减轻酸化对目标菌生长的影响，同时也提供磷元素，参与细胞能量代谢和核酸合成。氯化钠则用于维持适宜渗透压，使菌体处于较稳定的生理环境。

该培养基本身不含血液成分，因此不能观察溶血现象；也不含抗生素、胆盐或染料类抑菌剂，因此选择性较弱。实际检测中，肉汤增菌后通常需要转种至血琼脂平板等培养基，观察是否形成β溶血特征，并结合镜检、生化试验或其他确认方法综合判断。

四、使用方法

称取本品30.0 g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，按实验需要分装后，于121 ℃高压灭菌15 min。灭菌结束后冷却备用，并按标准方法或实验室验证方法接种样品，于36±1 ℃培养约24 h。

配制时应确保干粉完全溶解，避免局部高浓度糖类或盐类影响培养基均一性。灭菌时间不宜随意延长，以免葡萄糖受热分解、培养基颜色加深或营养成分受损。配制后的肉汤应澄清或轻微呈培养基本身颜色，无污染、异常沉淀或明显变色。若灭菌后pH偏离要求，应结合质控结果判断是否可用。

五、质量控制

注：原资料中的“乙型溶血性链球菌”建议规范写作“β型溶血性链球菌”。“浑浊度2”通常属于半定量观察指标，表示目标菌在肉汤中生长良好、可见明显混浊，具体等级应按企业内控或标准方法执行。

六、结果观察与应用提示

葡萄糖肉浸液肉汤为液体增菌培养基，培养后可通过肉汤混浊程度初步判断菌体增殖情况。但肉汤变浑浊并不能直接判定为β型溶血性链球菌阳性，因为样品中的其他细菌也可能在非选择性肉汤中生长。完整检测流程中，应将增菌液转种至合适的分离培养基，观察典型菌落和溶血特征，并进行后续确认试验。

若质控菌株生长不良，应重点检查培养基pH、灭菌条件、葡萄糖是否受热分解、干粉是否吸潮、分装容器是否洁净以及菌株活性。若肉汤培养后酸味明显、颜色异常或沉淀增多，可能与过度加热、储存时间过长或样品背景菌大量生长有关。对于链球菌类目标菌，培养温度、接种量、培养时间和后续血琼脂分离条件都会影响最终检出效果。

七、与血琼脂分离培养的关系

葡萄糖肉浸液肉汤主要承担增菌作用，而β溶血特征通常需要在含血平板上观察。β型溶血性链球菌在血琼脂上可表现为菌落周围清晰透明的完全溶血环，这是其重要初筛特征之一。肉汤增菌可提高目标菌数量，但不能替代血琼脂分离和确认步骤。

因此，在产品应用说明中应明确：本品用于增菌培养，不用于直接观察溶血；检测结果应结合后续分离培养、溶血表现和确认试验综合判定。对于食品样品或其他复杂样品，非选择性增菌可能同时促进背景菌生长，必要时应严格执行标准方法中的分离和纯化步骤。

八、贮存与注意事项

本品不得用于临床检验。干粉培养基使用后应立即密封，置于避光、干燥处保存，避免吸潮、结块和性能下降。称量时应注意粉尘防护，建议佩戴口罩并在通风良好的环境中操作。未开封产品在规定条件下保质期为三年；开封后受储存湿度、温度和使用频次影响，保质时间可能缩短。

配制后的培养基应按实验室验证条件保存，并尽量在规定期限内使用。若出现污染、明显变色、异常沉淀、pH异常或质控结果不符合要求，应停止使用并排查原因。检测后的带菌培养物、增菌液和接触样品的耗材，应经高压灭菌后再按实验室生物安全要求处理。

参考标准与资料

GB 4789.11-2014《食品安全国家标准 食品微生物学检验 β型溶血性链球菌检验》。

GB 4789.28-2024《食品安全国家标准 食品微生物学检验 培养基和试剂的质量要求》。

相关GB食品微生物检验方法中β型溶血性链球菌增菌、分离和确认要求。