Cary-Blair氏运送培养基:用于肠道致病菌样本保存与转运的半固体培养基

2026-06-23 15:08:06
逗点生物
简介

Cary-Blair氏运送培养基:用于肠道致病菌样本保存与转运的半固体培养基

一、产品用途与基本信息

项目 内容
产品名称 Cary-Blair氏运送培养基
英文名称 Cary-Blair Transport Medium
产品货号 GF1143
产品规格 250 g/瓶
产品类型 半固体运送培养基
主要用途 用于肠道致病菌样本的保存与运送
使用量 12.7 g/L
灭菌方式 流动蒸汽灭菌15 min
外观特点 半固体;溶解后可有沉淀,需混匀分装
最终pH 8.4±0.1(25 ℃)
保质期 未开封三年

二、配方组成、用量及作用

成分 用量(g/L) 主要作用 用途说明
硫乙醇酸钠 1.5 还原剂,降低氧化还原电位 减轻氧化环境对肠道致病菌,尤其是微需氧菌的损伤
氯化钠 5.0 维持渗透压稳定 保持细胞正常生理状态,减少转运期间渗透压应激
磷酸氢二钠 1.1 缓冲剂 稳定培养基pH,减少样本酸化对细菌存活的影响
氯化钙 0.09 提供钙离子 帮助维持细胞稳定性和培养基离子平衡
琼脂 5.0 半固体凝固剂 降低液体对流和氧扩散,便于拭子固定和样本运输
最终pH 8.4±0.1 提供弱碱性环境 有利于弧菌等肠道菌在转运期间保持活性

三、检验原理

Cary-Blair氏运送培养基的核心是“低营养维持 + 还原保护 + 弱碱性缓冲 + 半固体防氧化”。培养基中不含蛋白胨、糖类等丰富营养物质,因此不会明显促进样本中细菌快速繁殖,有助于维持原始菌群比例,减少背景菌过度生长对后续分离的影响。

硫乙醇酸钠可提供还原环境,降低氧化还原电位,对氧敏感或微需氧菌具有一定保护作用。磷酸氢二钠提供缓冲能力,防止样本中酸性代谢物导致pH快速下降。Cary-Blair氏运送培养基pH偏碱性,对霍乱弧菌等弧菌保存较为有利。氯化钠和氯化钙维持细胞所需的离子环境和渗透压稳定。少量琼脂使培养基呈半固体状态,可减少液体对流和氧扩散,同时避免样本在运输过程中剧烈晃动。

四、使用方法

称取本品12.7 g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解。由于本培养基溶解后可能出现沉淀物,分装前应充分混匀,保证各管成分均一。分装后采用流动蒸汽灭菌15 min,冷却后备用。

该类运送培养基通常不建议使用常规121 ℃高压灭菌,以免成分受热变化、氧化还原状态改变或半固体结构受到影响。制备后应检查管内培养基体积、外观、pH和无菌性。若出现明显干缩、污染、颜色异常、体积减少或pH偏离,应停止使用。

采样时,将带有样本的无菌棉拭子或肛拭子立即插入Cary-Blair氏运送培养基中,使拭子头部充分接触并埋入培养基,旋紧管盖,按规定条件转运至实验室。样本到达后应尽快接种相应培养基,不宜长期放置。

五、质量控制

质控指标 质控菌株及编号 质控条件 质控评定标准 结果说明
存活稳定性 空肠弯曲菌 ATCC 33291 1000~10000 CFU/0.1 mL接种棉拭子,25~28 ℃放置72 h后转种血平板,36±1 ℃培养18~24 h 生长良好 评价对微需氧肠道菌的保存能力
存活稳定性 鼠伤寒沙门氏菌 ATCC 14028 同上 生长良好 评价对沙门氏菌的运送保存能力
存活稳定性 霍乱弧菌 ATCC 14033 同上 生长良好 评价对弧菌类目标菌的保存能力
存活稳定性 副溶血性弧菌 ATCC 17802 同上 生长良好 评价对嗜盐性弧菌的保存能力
存活稳定性 福氏志贺氏菌 ATCC 12022 同上 生长良好 评价对较敏感肠道致病菌的保存能力

注:原资料中“福氏志贺氏菌 ATOC 12022”应修正为“福氏志贺氏菌 ATCC 12022”。此外,质量控制中写作“生长率”容易被误解为培养基促进增殖,建议技术资料中表述为“存活稳定性”或“运送保存性能”。

六、结果理解与应用提示

Cary-Blair氏运送培养基的质控重点是样本经过一定时间保存后,目标菌仍能在后续培养基上恢复生长。因此,质控结果中的“生长良好”并不是指细菌在Cary-Blair培养基中大量繁殖,而是表示经运送培养基保存后,转种至血平板或其他合适培养基仍能检出目标菌。

实际应用中,采样后应尽快转运和处理。对于志贺氏菌等相对脆弱的肠道菌,延迟培养可能降低检出率。对于弧菌,Cary-Blair的弱碱性环境具有一定优势,但仍应避免高温、干燥、泄漏和长时间滞留。若运输时间较长,应按对应标准或实验室方法控制温度和时间。

七、与增菌液和分离培养基的区别

Cary-Blair氏运送培养基常被误解为“保存后会让菌长起来”的培养基。实际上,它属于运送介质,营养极低,主要作用是保护而非增菌。样本送达实验室后,还需要根据目标菌种选择对应的增菌液或分离平板。

培养基类型 主要目的 典型特点 示例
运送培养基 维持目标菌活性,便于样本运输 低营养、半固体、保护性强 Cary-Blair氏运送培养基
增菌培养基 提高目标菌数量 营养较高,可含选择性成分 弯曲菌增菌液、沙门氏菌选择性增菌液
分离培养基 分离单菌落并初筛 固体平板,常含选择剂和指示剂 SS琼脂、DHL琼脂、CCDA琼脂

因此,Cary-Blair氏运送培养基不能替代后续选择性增菌、分离培养和鉴定试验。

八、常见问题与原因分析

若运送后目标菌检出率低,应重点检查培养基是否干缩、pH是否偏离、灭菌方式是否错误、样本是否未及时插入培养基、运输时间是否过长、运输温度是否过高,以及后续分离培养基是否合适。若将培养基误用121 ℃高压灭菌,可能影响还原环境和保存性能,应通过质控确认后再使用。

若培养基管内出现沉淀,通常属于配方成分溶解和冷却后的正常表现,分装前混匀即可。若沉淀异常增多、颜色改变、出现浑浊或可见污染,则不应使用。若运送过程中培养基液化、漏液或拭子头未充分接触培养基,也会影响目标菌保存效果。

九、贮存与注意事项

本品不得用于临床检验。干粉培养基使用后应立即密封,置于避光、干燥处保存,避免吸潮、结块和性能下降。称量时应注意粉尘防护,建议佩戴口罩并在通风良好的环境中操作。未开封产品在规定条件下保质期为三年;开封后受储存湿度、温度和使用频次影响,保质时间可能缩短。

配制后的运送培养基应密闭保存,避免干燥、污染和体积减少。使用前应检查外观、体积、pH和无菌性。采样后的带菌运送管、棉拭子和接触样品的耗材,应按实验室生物安全要求处理,必要时经121 ℃高压灭菌后废弃。

参考资料

FDA Bacteriological Analytical Manual:Cary-Blair Transport Medium。

CDC Laboratory Methods for the Diagnosis of Epidemic Dysentery and Cholera:Collection and Transport of Fecal Specimens。

相关食品、卫生和肠道病原菌检测方法中样本采集、保存与转运要求。