氯化镁孔雀绿大豆胨（RVS）增菌液：用于沙门氏菌选择性增菌的经典培养基

一、产品用途与基本信息

二、配方组成、用量及作用

三、检验原理

RVS增菌液的核心是“低pH + 高渗透压 + 孔雀绿 + 高温选择”。沙门氏菌相对于许多背景菌更能适应RVS体系中的选择压力，因此可在42 ℃、18～24 h培养条件下得到富集。大豆蛋白胨提供基础营养，支持沙门氏菌恢复和生长；氯化钠和氯化镁共同形成较高渗透压；孔雀绿作为抑菌染料，可抑制部分非目标菌；pH 5.2左右的偏酸环境进一步增强选择性。

与普通营养肉汤相比，RVS增菌液的营养并不追求“广泛支持所有细菌生长”，而是通过限制条件帮助沙门氏菌在竞争菌存在时获得优势。因此，RVS培养后是否混浊只说明培养液中有微生物生长，并不能直接判断是否为沙门氏菌。正确做法是将增菌液转种至选择性平板，观察疑似沙门氏菌典型菌落，再进行确认。

四、使用方法

称取本品26.6 g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装后于115 ℃高压灭菌15 min，冷却备用。

RVS增菌液含孔雀绿和较高浓度氯化镁，配制时应充分溶解并混匀。产品说明中提示“可有微量沉淀”，一般与高盐体系、镁盐和磷酸盐体系在加热灭菌后形成少量析出有关。若沉淀轻微且质控合格，通常不影响使用；若沉淀大量增加、颜色异常、pH偏离或质控不合格，应停止使用并排查水质、加热、灭菌和原料状态。

接种后按标准方法于42 ℃培养18～24 h。培养结束后转种XLD等选择性平板进行分离，观察疑似菌落。RVS增菌液不宜过度延长培养时间，因为部分耐受背景菌可能在长时间培养后恢复生长，影响后续分离效果。

五、质量控制

注：RVS增菌液的质控评价应结合后续平板结果。沙门氏菌在增菌液中生长后，转种XLD出现典型红色、有黑心菌落，才说明增菌与分离体系表现正常。

六、结果观察与判读

在XLD平板上，典型沙门氏菌可形成红色或淡红色菌落，并因产生硫化氢而出现黑心。但不同菌株、培养时间和培养基批次会影响菌落表现；少数沙门氏菌黑心不明显，部分非目标菌也可能产生黑色中心。因此，疑似菌落必须进行后续确认，不能仅凭XLD菌落颜色作最终判定。

七、与沙门氏菌检测流程的关系

食品中沙门氏菌检测通常包括预增菌、选择性增菌、选择性分离、生化确认和血清学确认等步骤。RVS增菌液属于选择性增菌阶段，通常在非选择性预增菌之后使用。预增菌有助于受损沙门氏菌恢复，RVS则进一步提高目标菌相对比例，降低背景菌干扰。

RVS增菌液尤其适合富集非伤寒沙门氏菌，在食品检测中应用广泛。实际检测时，常与另一种选择性增菌液或分离平板配合使用，以提高不同血清型沙门氏菌的检出机会。使用哪种增菌液、接种量和培养条件，应以GB 4789.4-2024及实验室确认方法为准。

八、与亚硒酸盐增菌液的区别

RVS增菌液和亚硒酸盐增菌液都可用于沙门氏菌选择性增菌，但选择性机制不同。RVS依靠低pH、高氯化镁、孔雀绿和42 ℃培养条件；亚硒酸盐增菌液则主要依靠亚硒酸盐对非目标菌的抑制作用。

选择哪一种增菌液，应以检测标准、样品类型和实验室验证结果为依据。

九、常见问题与原因分析

若沙门氏菌质控菌株在XLD上回收不足，应检查RVS配制浓度、pH、灭菌条件、培养温度、培养时间、菌株活性、接种量和XLD平板质量。RVS对温度和pH较敏感，培养温度偏低会降低选择性，温度偏高则可能抑制目标菌恢复。

若大肠埃希氏菌或粪肠球菌选择性不合格，应检查孔雀绿是否失效、氯化镁称量是否准确、pH是否偏高、培养时间是否过长，以及接种量是否过大。选择性培养基的抑制能力有限，若非目标菌初始菌量过高，仍可能在后续平板上有一定回收。

若培养基出现明显沉淀，应先判断是否为产品允许的微量沉淀。高氯化镁与磷酸盐体系在加热灭菌后可能产生少量沉淀，通常以质控结果为最终判断依据。若沉淀量大、培养基颜色异常或pH偏离，应重新配制并排查水质和灭菌条件。

十、安全与操作注意事项

本培养基含孔雀绿。孔雀绿属于染料类抑菌成分，具有一定职业健康和环境风险，称量和配制时应避免吸入粉尘、皮肤接触或误食。建议佩戴口罩、手套和护目镜，并在通风良好的环境中操作。含孔雀绿的废液和带菌培养物应按实验室生物安全和化学品管理要求处理。

RVS增菌液用于沙门氏菌检测，沙门氏菌为重要食源性致病菌。操作增菌液、疑似菌落和平板时应严格执行无菌操作和生物安全规范，避免气溶胶、交叉污染和实验室暴露。

十一、贮存、废物处理与注意事项

本品不得用于临床检验。干粉培养基使用后应立即密封，置于避光、干燥处保存，避免吸潮、结块和孔雀绿性能下降。称量时应注意粉尘防护。未开封产品在规定条件下保质期为三年；开封后受储存湿度、温度、光照和使用频次影响，保质时间可能缩短。

配制后的RVS增菌液应按实验室验证条件保存，并在规定期限内使用。若出现污染、明显变色、pH异常、大量沉淀或质控结果不符合要求，应停止使用并排查原因。检测后的带菌增菌液、平板、试管和接触样品的耗材，应置于121 ℃高压灭菌30 min后，再按实验室生物安全和含染料废物管理要求处理。

参考标准与资料

GB 4789.4-2024《食品安全国家标准 食品微生物学检验 沙门氏菌检验》。

ISO沙门氏菌检验相关方法。

Rappaport-Vassiliadis Medium with Soya（RVS）培养基及食品中沙门氏菌选择性增菌、分离和确认相关资料。