营养盐培养基（ASTM）：用于材料抗真菌和防霉性能测试的低营养无机盐琼脂

一、产品用途与基本信息

二、配方组成、用量及作用

三、检验原理

营养盐培养基的核心是“无机盐支持 + 低有机营养压力 + 材料表面真菌挑战”。培养基提供硝酸盐氮源、磷酸盐缓冲体系、镁、锰、铁、锌等微量元素以及水分，但不提供葡萄糖、蛋白胨、酵母浸粉等丰富有机营养。这样设计的目的，是避免培养基本身成为霉菌主要营养来源，从而使测试更聚焦于被测材料是否容易被霉菌定植、污染或利用。

在ASTM G21相关测试中，被测材料通常放置在营养盐琼脂表面，并接种混合霉菌孢子悬液。若材料或材料中的添加剂可被真菌利用，霉菌会在样品表面形成可见菌丝和孢子；若材料具有良好的抗真菌性能，样品表面霉菌生长较少或不生长。最终通常按材料表面霉菌覆盖程度进行等级评价。

因此，该培养基并不是为了让霉菌“长得越好越好”，而是为了提供一个标准化、可重复的挑战环境。质控菌株能够在培养基上生长，说明培养基具备支持霉菌基础生长和挑战试验的能力；但测试重点仍是被测材料表面的真菌生长情况。

四、使用方法

称取本品18.1 g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热至完全溶解，按实验需要分装后，于121 ℃高压灭菌15 min。灭菌后冷却至适宜温度，倾注无菌平板，凝固后备用。

由于培养基含多种无机盐和微量金属盐，灭菌后可能出现轻微浑浊或少量沉淀，这通常与磷酸盐、镁盐、铁盐、锌盐等在加热灭菌过程中的相互作用有关。若沉淀轻微且质控结果合格，一般不影响使用；若出现大量沉淀、明显分层、pH异常或质控不合格，应停止使用并排查水质、加热时间、灭菌条件和原料状态。

制备平板时应保证琼脂完全溶解、平板厚度均一、表面平整。抗真菌测试对湿度和培养条件较敏感，平板不宜过度干燥，也不宜表面水分过多，以免影响孢子分布和样品表面霉菌生长观察。

五、质量控制

六、结果观察与应用提示

营养盐培养基用于ASTM G21抗真菌性能测试时，结果通常不是按“每个平板多少CFU”来判定，而是观察被测材料表面霉菌生长覆盖程度。常见评价思路是根据样品表面可见霉菌生长比例进行等级划分，生长越少，说明材料抗真菌或防霉表现越好；生长越多，则说明材料更容易被霉菌污染或利用。

观察时应记录材料表面、边缘、与琼脂接触部位以及周围培养基上的霉菌生长情况。对于颜色较深或表面粗糙的材料，必要时可借助放大镜或显微观察，以避免漏判微弱菌丝。

七、与常规真菌培养基的区别

营养盐培养基与沙氏琼脂、PDA、孟加拉红培养基等常规真菌培养基的最大区别在于营养水平。常规真菌培养基通常含有葡萄糖、蛋白胨、马铃薯浸出物或酵母浸粉，可促进霉菌快速生长；营养盐培养基则尽量减少有机营养供应，用于评价材料本身对真菌生长的影响。

因此，营养盐培养基不应替代常规真菌计数培养基，也不适合用于一般样品中霉菌总数检测。

八、为什么灭菌后会浑浊或有少量沉淀

该培养基含有磷酸盐、镁盐、铁盐、锌盐、锰盐等多种无机盐。在加热和高压灭菌过程中，部分金属离子可能与磷酸根、氢氧根或其他离子形成微量难溶盐，导致培养基轻微浑浊或出现少量沉淀。这类现象在无机盐培养基中较常见。

只要沉淀量少、分布均匀、pH符合要求、无污染，并且黑曲霉质控生长符合标准，通常可认为不影响使用。若沉淀大量出现、培养基明显分层、颜色异常或表面粗糙不平，可能影响样品接触和结果观察，应重新配制并排查原因。

九、常见问题与原因分析

若黑曲霉质控生长不良，应检查培养基配制浓度、pH、灭菌条件、培养温度、湿度、接种孢子活性、孢子悬液浓度和培养时间。ASTM G21测试对湿度要求较高，环境过干可能导致孢子萌发不足，造成假阴性。

若被测样品全部无霉菌生长，但阳性对照也无生长，说明测试系统无效，可能是孢子悬液失活、培养条件不适宜或培养基性能异常。若阴性对照或未接种平板出现污染，说明无菌操作或培养基制备存在问题，应重新试验。

若样品周围培养基长满菌而样品表面不生长，应区分材料本身抗霉效果与营养扩散影响。若样品表面局部大量生长，可能与材料局部添加剂分布不均、表面污染、加工助剂迁移或样品处理方式有关。

十、标准应用边界

ASTM G21测试主要评价合成高分子材料在实验室高湿、有霉菌挑战条件下的抗真菌性能，属于材料性能筛选和质量控制方法。它不能完全等同于实际环境中的长期防霉表现，因为真实环境还会受到温度波动、紫外线、灰尘、营养沉积、机械磨损、清洁剂、材料老化等因素影响。

因此，ASTM G21结果适合用于材料配方比较、抗霉剂方案筛选、质量控制和客户技术验证。若产品用于特殊环境，如医疗、食品接触、室外长期暴露或高湿密闭环境，还应结合其他标准和实际使用条件进行综合评价。

十一、贮存、废物处理与注意事项

本品不得用于临床检验。干粉培养基使用后应立即密封，置于避光、干燥处保存，避免吸潮、结块和无机盐分布不均。称量时应注意粉尘防护，建议佩戴口罩并在通风良好的环境中操作。未开封产品在规定条件下保质期为三年；开封后受储存湿度、温度和使用频次影响，保质时间可能缩短。

配制后的营养盐培养基平板应按实验室验证条件保存，并在规定期限内使用。若出现污染、严重沉淀、pH异常、平板干裂、水膜过多或质控结果不符合要求，应停止使用并排查原因。试验后的霉菌培养物、样品、平板和接触材料应置于121 ℃高压灭菌30 min后，再按实验室生物安全要求处理。

参考标准与资料

ASTM G21-15《Standard Practice for Determining Resistance of Synthetic Polymeric Materials to Fungi》。

ASTM G21-15(2021)e1《Standard Practice for Determining Resistance of Synthetic Polymeric Materials to Fungi》。

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