改良沙堡弱琼脂培养基：一次性使用卫生用品真菌菌落总数检测的配方、原理及质控要点

一、产品概况

三、检验原理

改良沙堡弱琼脂培养基的核心是“真菌营养支持 + 细菌抑制 + 菌落显色”。葡萄糖和蛋白胨为酵母菌、霉菌提供生长所需的碳源、氮源和生长因子；pH 5.6左右的偏酸性环境适合多数真菌生长，同时可抑制部分细菌；氯霉素进一步抑制细菌背景；TTC可被具有代谢活性的菌体还原，生成红色或粉红色不溶性还原产物，使菌落更易观察。

TTC并不是专属于细菌的显色剂，酵母菌和部分霉菌也可表现出不同程度的TTC还原反应。因此，菌落颜色深浅会受到菌种、培养时间、菌落大小和TTC稳定性的影响。计数时应结合菌落形态进行判断，而不是仅凭颜色深浅判断是否为真菌。

四、使用方法

配制时应避免长时间高温保温或反复融化。TTC对光和热较敏感，氯霉素也应避免不必要的长时间加热。平板制备后应避光保存，并在经验证的使用期限内使用。

五、样品检测与结果报告要点

一次性使用卫生用品种类较多，包括卫生巾、卫生护垫、纸尿裤、卫生湿巾、棉签、棉柔巾等。不同样品的取样、洗脱、中和和稀释方式可能不同，应按GB 15979-2024及实验室文件执行。

真菌菌落总数检测中，若平板上菌落为0，应按标准规定结合样品状态、稀释倍数和接种量报告检测结果；若菌落超过可计数范围，应按方法要求选择合适稀释度或进行复测。

六、结果观察与判读

观察真菌菌落时，应注意区分酵母菌、霉菌、样品颗粒和细菌污染。酵母菌落通常圆形、湿润、凸起；霉菌菌落常呈绒毛状、粉状、丝状或带孢子结构。必要时可结合显微镜观察进行辅助判断。

七、质量控制

下列质控菌株接种后于30 ℃±1 ℃培养72 h～120 h，观察生长率和选择性。正式样品检测时，培养条件应以GB 15979-2024或实验室作业指导书为准。

若白色念珠菌、酿酒酵母或黑曲霉生长率低，应排查pH、灭菌条件、TTC稳定性、氯霉素浓度、平板保存时间和菌株活性。若大肠埃希氏菌或金黄色葡萄球菌明显生长，提示氯霉素抑制效果可能不足或培养基制备存在偏差。

八、与普通沙堡弱琼脂培养基的区别

改良配方的优势在于减少细菌干扰并增强真菌菌落可见性，更适合一次性使用卫生用品样品中真菌菌落总数测定。

九、常见问题与原因分析

十、使用与储存注意事项

本品为实验室微生物检验用培养基，不得用于临床诊断。称量干粉时应避免吸入粉尘，建议佩戴口罩、手套和实验服，在通风良好环境下操作。干粉培养基使用后应立即密封，避免吸潮结块，并贮存于避光、干燥处。

小结

改良沙堡弱琼脂培养基用于一次性使用卫生用品中真菌菌落总数检测。葡萄糖和蛋白胨为酵母菌、霉菌提供营养，氯霉素抑制多数细菌，TTC可被有代谢活性的真菌细胞还原，使部分菌落呈淡粉色或红色，便于观察和计数，琼脂则形成稳定固体平板。

使用时应注意三点：第一，现行标准应写作GB 15979-2024《一次性使用卫生用品卫生要求》，不是GB 15979-2025；第二，TTC和氯霉素相关培养基应避免过度加热、反复融化和长时间光照；第三，真菌菌落总数结果应按标准规定的接种量、培养条件、计数规则和报告单位执行，不能仅凭单个平板或非标准培养条件作出最终判断。