2×YT培养基：适用于基因工程大肠杆菌培养的高营养肉汤培养基

产品信息

配方组成与作用

2×YT培养基的应用特点

2×YT培养基本身不是选择性培养基，不含抗生素、诱导剂或显色底物。用于含质粒或表达载体的工程菌培养时，应根据载体抗性标记，在灭菌冷却后的培养基中无菌加入相应抗生素，如氨苄青霉素、卡那霉素、氯霉素或四环素等。抗生素通常不应随培养基一起高压灭菌，以免热降解导致筛选压力不足。

在实际应用中，2×YT常用于大肠杆菌 TOP10、DH5α、HB101、BL21 等常见实验菌株的液体培养。由于营养水平较高，它适合用于需要较高菌体量的培养步骤，例如质粒制备前扩大培养、噬菌体展示相关培养、噬菌粒扩增、工程菌种子液制备等。但对于蛋白表达实验，是否选择 2×YT 仍需结合目标蛋白性质、表达载体、诱导条件和后续纯化要求判断，并非营养越高越一定更优。

使用方法

称取 2×YT培养基干粉 31.0 g，加入约 900 mL 蒸馏水或去离子水中，搅拌并加热至完全溶解，再定容至 1 L。根据实验需要分装于三角瓶、试管、培养瓶或离心管中，121℃高压灭菌 20 min。灭菌结束后冷却备用。

用于常规大肠杆菌培养时，可接种新鲜单菌落或适量种子液，通常在 35～37℃条件下振荡培养 12～18 h。若用于质粒制备、噬菌体相关实验或蛋白表达前培养，应根据实验方案控制接种量、装液量、培养时间、振荡速度、抗生素浓度和诱导条件。培养过度可能导致菌体老化、质粒稳定性下降或后续实验重复性变差，因此不建议简单延长培养时间来追求更高浊度。

质量控制

产品可采用大肠埃希氏菌 ATCC 25922 和大肠杆菌 TOP10 作为质控菌株，在 36±1℃培养 12～18 h 后观察生长情况。合格培养基应支持质控菌株良好生长，肉汤出现明显浑浊，浑浊度达到规定要求。

储存条件与注意事项

本品应置于室温、避光、干燥处保存，使用后立即旋紧瓶盖，防止吸潮结块。未开封产品有效期为 3 年。若干粉出现明显结块、受潮、变色或其他异常情况，不建议继续使用，以免影响称量准确性、溶解性和培养效果。

本产品仅供科研、教学、工业检测及相关实验室用途，不得用于临床诊断。实验结束后的带菌培养物、移液吸头、培养瓶、离心管等污染物，应按实验室生物安全要求处理，通常可于 121℃高压灭菌 30 min 后再进行废弃处理。

小结

2×YT培养基是一种营养丰富、使用方便的分子生物学液体培养基。其配方由 16.0 g/L 胰蛋白胨、10.0 g/L 酵母提取物和 5.0 g/L 氯化钠组成，最终 pH 为 7.0±0.2。与常规 LB 肉汤相比，2×YT 提供更高水平的氮源、维生素和生长因子，适用于基因工程大肠杆菌培养、菌液制备、工程菌扩增、质粒相关实验前培养以及噬菌体或噬菌粒系统培养。