LB肉汤培养基(Lennox,pH 7.5):适用于低盐、偏高pH分子生物学实验的基础培养基

2026-06-25 14:14:27
逗点生物
简介

LB肉汤培养基(Lennox,pH 7.5):适用于低盐、偏高pH分子生物学实验的基础培养基

产品信息

项目 内容
产品名称 LB肉汤培养基(Lennox,pH 7.5)
英文名称 LB Broth(Lennox,pH 7.5)
产品货号 GF1253
包装规格 250 g/瓶
配制比例 20.0 g/L
灭菌条件 121℃高压灭菌 20 min
产品用途 用于分子生物学中对盐浓度敏感且需要偏高 pH 条件的试验;适用于大肠杆菌及工程菌株的活化、扩增培养、菌液制备、质粒制备前培养和蛋白表达前培养
参考来源 《分子克隆实验指南》相关配方

配方组成与作用

成分 用量(g/L) 主要作用 对培养基用途的贡献
胰蛋白胨 10.0 提供肽类、氨基酸、氮源和部分碳源 支持大肠杆菌及常用工程菌株生长
酵母提取物 5.0 提供维生素、核苷酸、矿物质和生长因子 促进菌体增殖,提高液体培养稳定性
氯化钠 5.0 维持渗透压和离子强度 构成 Lennox 低盐 LB 体系,适合盐敏感实验
最终 pH(25℃) 7.5±0.2 维持偏中性至微碱性培养环境 适用于需要较高 pH 条件的大肠杆菌培养实验

Lennox低盐配方与pH 7.5的应用特点

LB肉汤培养基常见配方之间的主要差异之一是氯化钠含量。Miller 型 LB 通常含 10.0 g/L 氯化钠,而 Lennox 型 LB 含 5.0 g/L 氯化钠。盐浓度变化会影响培养基渗透压、菌体生理状态、质粒稳定性和部分抗生素筛选表现,因此在分子克隆实验中应按实验方案选择对应配方,不宜将不同盐浓度的 LB 培养基随意替换。

本产品同时具备低盐和 pH 7.5 两个特点。低盐体系适合对盐浓度较敏感的实验,pH 7.5 则适合需要略偏碱性培养环境的实验条件。例如某些分子克隆步骤、质粒扩增前培养或蛋白表达前培养可能对培养基 pH 和盐浓度有明确要求,此时使用 Lennox,pH 7.5 配方有助于维持实验条件一致性。

需要注意的是,LB肉汤培养基本身不是选择性培养基,不含抗生素、诱导剂或特殊抑制剂。用于携带质粒或表达载体的工程菌培养时,应根据载体抗性标记,在灭菌冷却后的培养基中无菌加入相应抗生素,如氨苄青霉素、卡那霉素、氯霉素或四环素等。抗生素通常不应随培养基一起高压灭菌,以免热降解影响筛选压力。

使用方法

称取 LB肉汤培养基(Lennox,pH 7.5)干粉 20.0 g,加入约 900 mL 蒸馏水或去离子水中,搅拌并加热至完全溶解,再定容至 1 L。根据实验需要分装于三角瓶、培养瓶、试管或离心管中,121℃高压灭菌 20 min。灭菌结束后冷却备用。

用于常规大肠杆菌培养时,可接种新鲜单菌落或适量种子液,通常在 35~37℃条件下振荡培养 12~18 h。若用于质粒制备前培养,应控制接种量、培养体积、装液量、培养时间和抗生素浓度,避免过度培养导致菌体老化、质粒稳定性下降或后续提取效果波动。若用于蛋白表达相关实验,应根据宿主菌株、表达载体、诱导剂浓度、诱导温度和目标蛋白性质优化培养条件。

LB肉汤可用于工程菌短期活化和培养,但不宜单独作为长期保存体系。若需保存大肠杆菌或工程菌菌种,通常应与无菌甘油等保护剂配合制备甘油菌,并置于低温条件下保存。

质量控制

产品可采用大肠埃希氏菌 ATCC 25922、大肠杆菌 DH5α 和大肠杆菌 TOP10 作为质控菌株,在 36±1℃培养 12~18 h 后观察生长情况。合格培养基应支持质控菌株良好生长,肉汤出现明显浑浊,浑浊度达到规定要求。

质控菌株 培养条件 质控评定指标
大肠埃希氏菌 ATCC 25922 36±1℃,12~18 h 肉汤浑浊,浑浊度 2
大肠杆菌 DH5α 36±1℃,12~18 h 肉汤浑浊,浑浊度 2
大肠杆菌 TOP10 36±1℃,12~18 h 肉汤浑浊,浑浊度 2

储存条件与注意事项

本品应置于室温、避光、干燥处保存,使用后立即旋紧瓶盖,防止吸潮结块。未开封产品有效期为 3 年。若干粉出现明显结块、受潮、变色或其他异常情况,不建议继续使用,以免影响称量准确性、溶解性、pH 和培养效果。

本产品仅供科研、教学、工业检测及相关实验室用途,不得用于临床诊断。实验结束后的带菌培养物、移液吸头、培养瓶、离心管等污染物,应按实验室生物安全要求处理,通常可于 121℃高压灭菌 30 min 后再进行废弃处理。

小结

LB肉汤培养基(Lennox,pH 7.5)是一种低盐、偏高 pH 的分子生物学基础液体培养基,由 10.0 g/L 胰蛋白胨、5.0 g/L 酵母提取物和 5.0 g/L 氯化钠组成,最终 pH 为 7.5±0.2。该培养基适用于对盐浓度敏感且需要较高 pH 条件的大肠杆菌及工程菌株培养,可用于菌株活化、扩增培养、菌液制备、质粒制备前培养和蛋白表达前培养。对于明确要求 Lennox 低盐体系和 pH 7.5 条件的实验,该培养基有助于保持实验条件稳定和结果重复性。