猪肉食品中氯霉素检测的固相萃取方法（Copure® C18）

2019-07-30 10:18:01

逗点生物

简介：《GB/T 22338-2008 动物源性食品中氯霉素类药物残留量测定》

一、样品提取

称取均质后的 5.0 g 猪肉试样，精确到 0.01 g。置于 50mL 离心管中，加入 5 mL 水，于涡旋混合器上快速混合 1min，使试样完全溶解。准确加入 15 mL 乙酸乙酯，在振荡器上振荡 10 min，以 3000 r/min 离心 10 min，准确吸取上层乙酸乙酯 12 mL 转入 15 mL 的离心管中，置于浓缩吹氮仪在 45 ℃吹扫蒸干，加入 5 mL 水溶解，待净化。

二、SPE 柱净化

实验材料： Copure® C18，1000 mg/6 mL

(1) 活化：小柱使用前依次采用 5 mL 甲醇、5 mL 水活化。
(2) 上样和洗脱：将待净化液过柱，待溶液完全流出后，用2×3 mL水过柱，然后再用5 mL乙腈/水溶液(2:8, v/v)淋洗，弃去全部淋出液。用真空泵减压抽干小柱，最后用6 mL 乙酸乙酯洗脱，收集洗脱液。
(3) 重新溶解：洗脱液于 45 ℃用氮气吹干，用乙腈 / 水溶液 (2:8, v/v) 定容至 1 mL，经有机滤膜过滤后上机供 LC-MS/MS 测定。

三、仪器条件

质谱仪：API 4000
色谱柱：Venusil ASB C18 (2.1 mm×150 mm, 5 µm)
流动相：A：10 mmol/L 乙酸铵溶液 B：甲醇
流速：0.2 mL/min
柱温：40 ℃
进样体积：5 µL
离子源：电喷雾 (ESI)，负离子模式
检测方式：多反应监测 (MRM)

表 1 质谱仪离子源参数