猪肉食品中氯霉素残留检测的固相萃取方法（Copure® HLB）
- 2019-07-30 10:27:30
- 逗点生物
一、样品提取
取均质后的 5.0 g 猪肉样品，于 50 mL 离心管中，加入 20mL 乙酸乙酯混合 2 min，4000 r/min 离心 15 min，取上清液于另一离心管中，再用 20 mL 乙酸乙酯重复提取残渣 1 次，合并两次提取液，并加入 500 μL 氨水，于 45 ℃旋转蒸发近干，加入 500 μL 甲醇混合 1 min，加入 10 mL 4 % NaCl涡旋混匀 10 s，加入 10mL 正己烷摇匀 20 次，4000 r/min离心 5 min，弃去上层，再用 10 mL 正己烷脱脂一次，最后加入 500 μL 氨水混匀待净化。二、SPE 柱净化
实验材料： Copure® HLB，60 mg/3 mL
(1) 活化：依次用 2 mL 甲醇、2 mL 水活化。(2) 上样和洗脱：取上述备用液重力作用下过柱依次用 2mL 水、1 mL 甲醇 / 乙腈 / 水 / 氨水 (15:15:65:5, v/v)淋洗小柱并抽干，最后用 2 mL 5 % 氨化甲醇溶液洗脱小柱，收集流出液。
(3) 重新溶解：洗脱液于 45 ℃氮气吹至近干，准确加入1.0 mL 甲醇 / 水溶液 (4:6, v/v) 溶解，涡旋混匀经 0.22µm 滤膜过滤，供高效液相色谱测定。
三、仪器条件
设备：Waters Alliance 2695色谱柱：Welch Ultimate XB-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 µm)
检测器：Waters 2487 紫外检测器
检测波长：268 nm
流动相：A：水 B：甲醇
洗脱方式：等度洗脱，A:B=60:40
流速：1.0 mL/min
柱温：30 ℃
进样量：20 µL
四、实验结果
表 1 添加水平为 0.5 mg/kg 猪肉基质中氯霉素 (CAP) 的添加回收结果
表 2 W 品牌同型号柱，添加水平为 0.5 mg/kg 猪肉基质中氯霉素 (CAP) 的添加回收结果
图 1 添加水平为 0.5 mg/kg 猪肉基质中氯霉素 (CAP) 检测色谱图
五、订购信息
