鱼肉中甲砜霉素检测的固相萃取方法（Copure® C18）
- 2019-07-31 10:17:50
- 逗点生物
一、样品提取
取均质后鱼肉 5.00 g（精确到 0.01 g）到 50 mL 离心管，加 6.0 g 无水硫酸钠，再加 10 mL 乙腈，超声 5 min，振荡 5 min，4000 r/min 离心 5 min 取上清液 8 mL 到 15 mL离心管，氮气吹干；加 5 mL 水溶解，再加 5 mL 正己烷除脂，涡旋混匀，4000 r/min 离心 3 min，上层有机相弃去，分层处正己烷用氮气吹干，下层待净化。二、SPE 柱净化
实验材料： Copure® C18，500 mg/6 mL
(1) 活化：C18 固相萃取柱依次加 5 mL 甲醇，5 mL 水平衡。(2) 上样和洗脱：加入待净化溶液，弃去流出液；再加10 mL 水淋洗，弃去流出液，抽干小柱；加入 8 mL 甲醇洗脱，收集流出液（上样、洗脱过程控制流速在 1 mL/min 以内）。
(3) 重新溶解：洗脱液 40 ℃下氮气吹至近干，用 1 mL20 % 乙腈水溶液溶解，经 0.22 μm 滤膜过滤，供高效液相色谱测定。
三、仪器条件
设备：Waters Alliance 2695色谱柱：Welch Ultimate XB-C8 (4.6 mm×250 mm, 5 μm)
检测器：Waters 2487 紫外检测器
检测波长：224 nm
流动相：A：乙腈 B：水
洗脱方式：等度洗脱，A: B=20: 80
流速：1.0 mL/min
进样体积：20 μL
四、实验结果
表 1 64.0 μg/kg 鱼肉中甲砜霉素的添加回收结果
图 1 添加水平为 64.0 μg/kg 甲砜霉素检测的液相色谱图
五、订购信息
