辣椒粉、辣椒油和辣椒酱中的苏丹红（逗点生物 Copure® 苏丹红分子印迹柱 )

在依据标准 《GB/T 19681-2005 食品中苏丹红染料的检测方法 高效液相色谱法》检测苏丹红时，用中性氧化铝固相萃取小柱进行样品净化，存在柱性能稳定性差的问题，同时处理辣椒酱等复杂基质样品存在干扰。针对上述技术问题，逗点生物推出了改良版的苏丹红分子印迹固相萃取柱，柱性能稳定性高，同时优化了样品前处理流程。

一、标准溶液的配制

1.1 苏丹红标准中间溶液（100μg/mL）：吸取1mL苏丹红标准储备液（1000μg/mL），用正己烷定容至10mL。

1.2 苏丹红标准中间溶液（10μg/mL）：吸取1mL苏丹红标准储备液（100μg/mL），用正己烷定容至10mL。

1.3 苏丹红标准中间溶液（10μg/mL）：吸取0.1mL苏丹红标准储备液（1000μg/mL），用乙腈定容至10mL。

注：1.1和1.2标准中间溶液用于样品加标；1.3标准中间溶液用于曲线配制。

二、样品前处理

2.1 样品提取

2.1.1 辣椒油

称0.5g辣椒油，加入5mL正己烷溶解，待净化。

2.1.2  辣椒粉

称1g辣椒粉，加入20mL正己烷，涡旋10min，超声5min，4000转/5min，移取上清液；残渣用10mL正己烷重复提取1次，合并2次正己烷上清液，40℃氮吹至5mL以下，涡旋均匀待净化。

2.1.3 辣椒酱

  称取5g均匀样品于50mL离心管中，加入5g无水硫酸钠，加入20mL正己烷，振荡提取10min，4000r/min离心5min，转移正己烷层，下层用20mL正己烷重复提取，10000r/min离心5min，合并所有正己烷层， 40℃氮吹干，加入5mL正己烷复溶完全后作为待净化液。

2.2 样品净化（COMIPSD-PLUS01—适用于辣椒油、辣椒粉基质；COMIPSD-PLUS02—适用于辣椒酱基质）

活化 10mL正己烷，弃去；

上样 全部待净化液过柱，弃去；

淋洗 5mL正己烷，弃去；

洗脱 15mL 30%乙酸乙酯正己烷分3次洗脱，收集洗脱液。

氮吹复溶：洗脱液40℃氮吹干，加入5mL丙酮复溶，过亲水PTFE滤膜。

2.3 标准系列工作液

吸取适量中间液，用乙腈逐级稀释，得到浓度为0.02μg/mL、0.05μg/mL、0.1μg/mL、0.2μg/mL、0.5μg/mL、1μg/mL、2μg/mL。根据样品浓度选择至少5个点建立校准曲线。

注：1）洗脱液建议分次洗脱；

2）复溶液尽量选择丙酮，不要用乙腈，会出现复溶不完全的情况；

3）标曲配置建议用乙腈配置，用正己烷和丙酮配置曲线时，苏丹红峰形可能会出现异常。

三、仪器条件

仪器：ThermoFisher U3000液相色谱仪

色谱柱：CommaSil®C18  (4.6 mm×250 mm，5μm)

流动相：A：0.02%磷酸水；B：乙腈

洗脱方式：A：B=5:95 等度洗脱

流速：1 mL/min，柱温：30 ℃，进样量：20μL

检测器：紫外检测器，检测波长：478 nm（苏丹红Ⅰ）、520nm（苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅲ、苏丹红Ⅳ）

四、实验结果

4.1实验结果

表1 辣椒粉中苏丹红的添加回收结果

表2 辣椒油中苏丹红的添加回收结果

表3 辣椒酱中苏丹红的添加回收结果

图1 加标浓度为0.04μg/mL时辣椒粉中苏丹红液相色谱图

图2 加标浓度为1μg/mL时辣椒粉中苏丹红液相色谱图

图3 加标浓度为0.04μg/mL时辣椒油中苏丹红液相色谱图

图4 加标浓度为1μg/mL时辣椒油中苏丹红液相色谱图

图5 加标浓度为0.04μg/mL时辣椒酱中苏丹红液相色谱图

图6 加标浓度为1μg/mL时辣椒酱中苏丹红液相色谱图

五、订购信息