- 1 细胞培养基
- 1.1 细胞培养基的种类以及如何选择
- 1.2 细胞培养必看:吃透RPMI 1640培养基,告别细胞状态差(避坑指南)
- 1.3 细胞培养必看:DMEM培养基,从入门到精通(避坑指南)
- 1.4 细胞培养基核心成分解析:吃透配方逻辑,读懂细胞生长的营养底层逻辑
- 1.5 又简单又好用的学霸笔记:贴壁细胞培养实操细节指南
- 1.6 贴壁细胞胰酶消化全解析:选型、原理与精细化实操优化技巧
- 1.7 高性价比国产细胞培养基筛选指南:核心指标深度解析
- 1.8 细胞培养必看:青霉素绝非万能防污染神器,误用反而毁实验
- 1.9 超全细胞污染图鉴:5大污染类型识别、处理与避坑指南
- 1.10 从源头控污:深度解析内毒素对细胞培养的危害与低内毒素质控方案
- 1.11 细胞复苏:冻存细胞活化的标准化操作技术
- 1.12 细胞传代:体外细胞扩增的标准化操作技术
- 1.13 细胞冻存:低温保藏细胞的标准化操作技术
- 1.14 微观培养的核心密码 基础培养基组分与细胞生
- 1.15 人外周血淋巴细胞分离液标准化应用技术指南
- 1.16 支原体污染防治标准化指南:检测技术、清除方案与细胞培养全流程防护
- 1.17 体外细胞培养内毒素污染防控标准化指南
- 1.18 细胞多模式低温冻存技术指南:三种降温方案完整操作流程
- 2 缓冲液
- 3 基因工程菌培养基
- 3.1 LB肉汤培养基(Lennox):分子生物学常用低盐LB培养基
- 3.2 LB琼脂培养基(pH 7.5):适用于高pH分子生物学实验的基础培养基
- 3.3 LB肉汤培养基:分子生物学中大肠杆菌培养的经典基础培养基
- 3.4 2×YT肉汤培养基:适用于基因工程大肠杆菌培养的高营养肉汤培养基
- 3.5 2×YT琼脂培养基:适用于基因工程大肠杆菌培养的高营养固体培养基
- 3.6 SB培养基:适用于质粒制备和蛋白表达前培养的高营养肉汤培养基
- 3.7 TB培养基:适用于大肠杆菌高密度培养和蛋白表达的营养型肉汤培养基
- 3.8 LB琼脂培养基(Miller):分子生物学中大肠杆菌固体培养的经典培养基LB琼脂培养基(Miller):分子生物学中大肠杆菌固体培养的经典培养基
- 3.9 LB Pro肉汤培养基:适用于大肠杆菌快速增菌与分子生物学实验的基础培养基
- 3.10 LB琼脂培养基(Lennox):适用于盐浓度敏感实验的低盐LB固体培养基
- 3.11 SOB肉汤培养基:用于感受态细胞制备与转化复苏的经典培养基
- 3.12 SOC肉汤培养基:用于感受态细胞转化后复苏的经典培养基
- 3.13 SOC琼脂培养基:用于基因工程大肠杆菌转化后培养的营养型固体培养基
- 3.14 YPD琼脂培养基(含葡萄糖,琼脂):酿酒酵母和毕赤酵母常用的完全固体培养基
- 3.15 YPDA琼脂培养基(含葡萄糖,琼脂):添加硫酸腺嘌呤的酵母完全固体培养基
- 3.16 YNB(含硫酸铵,不含氨基酸):酵母缺陷型培养基的基础氮源体系
- 3.17 DO Supplement -His:用于制备缺组氨酸酵母筛选培养基的营养补充物
- 3.18 DO Supplement-Trp:用于制备缺色氨酸酵母筛选培养基的营养补充物
- 3.19 DO Supplement-Leu:用于制备缺亮氨酸酵母筛选培养基的营养补充物
- 3.20 DO Supplement-Ura:用于制备缺尿嘧啶酵母筛选培养基的营养补充物
- 3.21 DO Supplement-Ade:用于制备缺腺嘌呤酵母筛选培养基的营养补充物
- 3.22 DO Supplement-Met-His:用于制备缺甲硫氨酸、缺组氨酸酵母筛选培养基的双缺补充物
- 3.23 DO Supplement-Leu-Trp:用于制备缺亮氨酸、缺色氨酸酵母双缺筛选培养基的补充物
- 3.24 DO Supplement-Ade-Ura:用于制备缺腺嘌呤、缺尿嘧啶酵母双缺培养基的补充物
- 4 核酸纯化
- 5 植物培养基
细胞培养基的种类以及如何选择
- 2026-06-24 15:57:07
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细胞培养基的种类以及如何选择
一、常见的细胞培养基
细胞培养基既是培养细胞中供给细胞营养和促使细胞生殖增殖的基础物质,也是培养细胞生长和繁殖的生存环境。
• 基础培养基(MM)
基础细胞培养基主要成分是氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和其它一些辅助物质。合成培养基使用时还需添加一定量的血清使细胞保持良好的生长状态。
培养基的种类有很多,其中DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12是应用较为广泛的。其他如M199、IMDM、L15培养基等也用于某些细胞的培养。具体的特征及应用如下:
培养基 |
特征 |
应用 |
BME细胞培养基 |
1955年Eagle设计,以BSS为基础,添加8种维生素,13种氨基酸,成分简单、便于添加 |
适于各种细胞系和特殊研究用,在此基础上改良的细胞培养基品种有MEM、DMEM、IMDM等 |
MEM细胞培养基 |
由Harry Eagle在Eagle基本培养基(BEM)的基础上发展而来的。MEM培养基仅含有12种必需氨基酸、谷氨酰胺和8种维生素,成分简单,主要用于贴壁细胞的培养,1959年修改配方,删去赖氨酸、生物素,增加氨基酸浓度,配方修改后也可用于其他类型细胞培养 |
适合多种细胞单层生长,是一种最基本、适用范围最广的培养基。因其营养成分所限,针对生产之特定细胞培养与表达时,并不一定是使用效果最佳或者最经济的培养基。此外,MEM细胞培养基有含Earle's平衡盐的类型,也有含Hanks'平衡盐的类型;有高压灭菌型的,也有过滤除菌型的;还有含非必需氨基酸的类型。应根据实际情况注意选择合适的 MEM 细胞培养基 |
M199细胞培养基 |
1950 年由 Morgan 等设计,除 BSS 外,含有53 种成分 |
添加适量的血清后,可广泛用于多种细胞培养,可用于病毒学、疫苗生产以及大鼠胰腺上皮细胞和小鼠晶状体组织的培养 |
DMEM细胞培养基 |
由Dulbecco改良的 Eagle 培养基,DMEM的氨基酸浓度是MEM的两倍,维生素浓度是MEM的4倍,同时还增加了非必须氨基酸、微量铁离子以及丙酮酸钠。分低糖型(1000mg/L)、高糖型(4500mg/L) |
常用于杂交瘤的骨髓瘤细胞和 DNA 转染的转化细胞培养。例如 CHO 细胞表达生产乙肝疫苗、CHO 细胞表达EPO |
IMDM细胞培养基 |
由Iscove's改良的Eagle培养基,IMDM培养基在DMEM培养基的基础上添加了硒、HEPES、丙酮酸钠以及额外的氨基酸和维生素,营养非常丰富 |
可用于杂交瘤细胞和高密度细胞的快速培养 |
RPMI-1640细胞培养基 |
Moore等人于1967年在Roswell Park Memorial Institute研制,针对淋巴细胞培养设计,BSS+21种氨基酸+维生素11种等成分 |
广泛应用于各种正常细胞和癌细胞的培养,尤其是悬浮细胞的培养 |
Ham's F10、F12细胞培养基 |
1963年、1969年由Ham设计,含微量元素,Ham's F-12以Ham's F-10营养混合物为基础设计而成的,可在血清含量低时用 |
F10适用于仓鼠、人二倍体细胞,F12适用于CHO细胞。在低血清含量下时,特别适合单细胞培养和克隆化培养,添加血清后也广泛应用于癌细胞和原代细胞的培养,如大鼠肝细胞、大鼠前列腺上皮细胞、软骨细胞、大鼠成肌细胞、鸡胚胎细胞等 |
DMEM/F12细胞培养基 |
在DMEM培养基的基础上,添加F12培养基中更为丰富的营养成分,含有多种微量元素 |
广泛应用于多种哺乳类细胞的培养。同时,常作为开发无血清培养基的基础,也适用于低血清含量下哺乳动物细胞的培养以及克隆密度培养 |
McCoy's 5A培养基 |
Thomas McCoy等人在1959年设计的培养基,最初专门用于Novikoff Hepatoma细胞的培养。McCoy's 5A培养基是改良的Basal Medium 5A,与其他培养基不同的是,McCoy's 5A含有还原型谷胱甘肽、细菌蛋白胨以及高浓度的葡萄糖 |
McCoy's 5A广泛用于多种类型的原代细胞的培养,如骨髓、皮肤、牙龈、肾、脾、肺、大鼠胚胎、网膜等。此外McCoy's 5A培养基还用于组织活检培养、细胞建系,以及一些淋巴细胞和较难培养的细胞的培养 |
L15细胞培养基 |
L-15培养基的缓冲系统由磷酸盐和游离碱基氨基酸组成,代替了传统的碳酸氢钠缓冲系统,同时,用半乳糖和丙酮酸钠代替葡萄糖可以防止酸性代谢副产物的形成,有助于维持培养液PH的稳定,适合用于非CO2平衡环境的细胞培养 |
L-15培养基适用于猴肾细胞和HEP-2的培养、原代(如胚胎和成人组织)细胞分离、多种病毒的培养以及神经元的培养等 |
• 完全培养基(CM)
完全培养基是在基础培养基中添加了血清、抗生素等物质,也叫(血清)细胞培养基。其中大部分细胞培养常用的是牛血清,因为牛血清中含有促进细胞增殖的各种生长因子。此外为防止污染,培养液中尚需加一定量的抗生素。
完全培养基根据添加血清量的多少,可分为细胞生长培养基和细胞维持培养基,用于不同细胞和不同研究。
• 无血清细胞培养基(SFM)
无血清培养基是指在合成培养基的基础上引入成分完全明确或部分明确的血清替代成分,主要是由基础培养基和添加物(替代血清的补充因子)组成。其主要成分为下列几种:
黏附因子
约有80%的细胞是属于贴附型生长。一般的细胞培养基是利用血清作为其来源,在无血清培养基中,细胞黏附因子就是很重要的物质。
生长因子
生长因子是维持细胞活性与促进细胞增生、迁移、分化等,不可或缺的要素。
酶抑制剂
贴附型细胞一般多以胰蛋白酶(trypsin)进行传代。在一般细胞培养中,血清中含有抑制trypsin的成分,所以无血清培养基必须添加trypsin抑制剂。
细胞转入无血清培养之前,要留有种子细胞,种子细胞按常规培养于含血清的培养基中,以保证细胞的特性不发生变化。
优点
1、未知组分少;
2、避免血清对细胞的毒性作用和血清源性污染;
3、杂蛋白含量少,避免血清成分影响研究结果或是产品制程,提高产品表达水平并易于纯化。
缺点
1、无血清培养基成本较高;
2、不是所有的细胞都能在无血清培养基中培养;
3、细胞在无血清培养基中易受某些机械因素和化学因素的影响,培养基保存和应用方面局限性很大。
二、细胞培养基的选择
细胞培养基的种类很多,如何选择适宜的培养基是细胞培养的关键。在此提供以下建议可供参考:
1、如果是新购买的细胞,可以向细胞株的厂家咨询,或者询问引种来源查找细胞库上对应的培养基;
2、根据细胞的特点及实验的需要来选择培养基;
3、自己试验,用多种培养基培养细胞,做生长曲线,记录细胞的生长速度,观察细胞的形态变化,根据实验结果选择最佳培养基。
培养基种类和细胞系并不是一个强制的对应关系。具体培养细胞使用什么培养基,主要还是根据数据库、文献和经验哦!




