LB肉汤培养基：分子生物学中大肠杆菌培养的经典基础培养基

产品信息

配方组成与作用

LB肉汤培养基的应用特点

LB肉汤培养基本身不是选择性培养基，不含抗生素或特殊抑制剂，主要功能是为细菌提供基础营养环境。在分子克隆实验中，如需筛选携带抗性标记的工程菌，应在灭菌冷却后的培养基中无菌加入相应抗生素，例如氨苄青霉素、卡那霉素、氯霉素或四环素等。抗生素通常不应随培养基一起高压灭菌，以免热降解影响筛选效果。

该产品适用于大肠杆菌 ATCC 25922、DH5α、HB101、TOP10、BL21 等常见实验菌株的液体培养。对于质粒提取实验，通常先在含相应抗生素的 LB肉汤中培养转化子，使菌体达到足够生物量后再进行质粒抽提。对于蛋白表达实验，LB肉汤也常用于种子液制备和表达前培养，但具体培养时间、接种比例、诱导时机和温度需根据菌株、载体和目标蛋白性质确定。

需要注意的是，LB肉汤可用于菌株短期活化和培养，但不宜单独作为长期保存体系。长期保存大肠杆菌菌种时，通常需要与无菌甘油等保护剂配合，制备甘油菌后置于低温条件下保存。

使用方法

称取 LB肉汤培养基干粉 25.0 g，加入约 900 mL 蒸馏水或去离子水中，搅拌并加热至完全溶解，再定容至 1 L。根据实验需要分装于三角瓶、试管、培养瓶或离心管中，121℃高压灭菌 20 min。灭菌结束后冷却备用。

用于常规菌液培养时，可接种新鲜单菌落或适量菌液，常用培养条件为 35～37℃振荡培养 12～18 h。若用于质粒扩增或蛋白表达相关实验，应根据实验方案控制接种量、培养体积、装液量、振荡速度、抗生素浓度和培养时间，避免过度培养导致菌体状态下降、质粒丢失风险增加或表达背景升高。

质量控制

产品可采用大肠埃希氏菌 ATCC 25922、大肠杆菌 DH5α 和大肠杆菌 HB101 作为质控菌株，在 36±1℃培养 12～18 h 后观察生长情况。合格培养基应支持质控菌株良好生长，肉汤出现明显浑浊，浑浊度达到规定要求。

储存条件与注意事项

本品应置于室温、避光、干燥处保存，使用后立即旋紧瓶盖，防止吸潮结块。未开封产品有效期为 3 年。若干粉出现明显结块、受潮、变色或其他异常情况，不建议继续使用，以免影响称量准确性、溶解性和培养效果。

本产品仅供科研、教学、工业检测及相关实验室用途，不得用于临床诊断。实验结束后的带菌培养物、移液吸头、培养瓶、离心管等污染物，应按实验室生物安全要求处理，通常可于 121℃高压灭菌 30 min 后再进行废弃处理。

小结

LB肉汤培养基是一种经典、通用、操作简便的分子生物学基础液体培养基。其配方由胰蛋白胨、酵母提取物和 10.0 g/L 氯化钠组成，最终 pH 为 7.0±0.2，适用于大肠杆菌及常用工程菌株的活化、扩增培养、菌液制备、质粒制备前培养和蛋白表达前培养。对于常规实验室分子克隆工作，LB肉汤培养基是使用频率较高的基础培养基之一。