实验室技术 | 生物安全柜的正确使用方法与注意事项

在微生物实验室中，生物安全柜（Biological Safety Cabinet，BSC）是保障人员安全、样品安全和环境安全的重要设备，尤其适用于涉及潜在致病微生物、感染性材料或易产生气溶胶的操作场景。
不过，很多人会把“生物安全柜”误认为是“万能保护箱”，实际上，它的保护效果依赖于正确使用、设备运行正常以及规范的操作习惯。一旦使用不当，安全柜的防护能力会明显下降，甚至失去作用。

本文结合实验室常见操作要求，对生物安全柜的使用方法、注意事项和管理要点进行系统梳理，帮助实验人员建立更安全、更规范的操作习惯。

一、生物安全柜是什么？为什么必须规范使用？

生物安全柜是一种通过定向气流和高效过滤系统，对操作人员、实验样品以及实验环境提供保护的设备。它主要用于：

• 微生物接种、分离和转接

• 病原微生物或疑似污染样品的处理

• 容易产生气溶胶的实验操作

• 需要无菌环境保护的样品处理

但要注意，生物安全柜的保护作用是有条件的。
它并不是在任何情况下都能提供完整防护，尤其是在以下情况中，防护效果会明显下降：

• 样品溢出

• 玻璃器皿破损

• 操作动作不规范

• 柜内物品摆放过多

• 气流被人为干扰

因此，使用前必须理解它的工作原理，也要明确它的局限性。

二、使用前必须接受培训，了解“能做什么”和“不能做什么”

在正式使用生物安全柜之前，应参考国家标准和相关文献，对所有可能使用者进行培训，内容至少包括：

• 生物安全柜的基本结构与工作原理

• 设备适用范围

• 正确操作步骤

• 常见错误操作

• 维护与消毒要求

• 发生溢出或破损时的应急处理方式

同时，实验室应向工作人员提供书面的规章、安全手册或操作手册，确保每位使用者都清楚知道操作边界。

尤其要强调的是：
当出现溢出、破损或不良操作时，安全柜并不能自动消除风险。
这时不仅要立即停止操作，还要按实验室应急程序进行处理。

三、生物安全柜只有“运行正常”时才可以使用

使用生物安全柜前，第一件事不是开始实验，而是确认设备状态是否正常。
只有在风机、过滤系统、气流和报警状态都正常时，才能开展操作。

常规检查内容包括：

• 风机是否正常运行

• 气流是否稳定

• 观察窗位置是否符合要求

• 柜内是否清洁

• 是否存在报警或故障提示

• 消毒是否完成

如果设备处于异常状态，即使只是短时间使用，也可能带来污染风险或暴露风险。

四、使用过程中最关键的原则：不要破坏气流

生物安全柜的核心防护机制依赖于内部气流的稳定流动。因此，操作过程中最重要的一条原则就是：
尽量不要干扰气流。

1. 观察挡板不能随意打开

在使用过程中，不能打开玻璃观察挡板。
观察挡板的位置是经过设计的，目的是确保柜内气流维持在合理状态。随意打开会改变气流方向，影响柜体保护性能。

2. 柜内物品不要放得太多

柜内应尽量少放置器材或标本，避免堆积过多物品。

如果柜内摆放过多，会导致：

• 后部压力排风系统受阻

• 气流循环受影响

• 局部形成死角

• 增加污染和暴露风险

建议只放置当前操作必须使用的物品，并尽量按顺序摆放，减少杂乱堆积。

3. 操作尽量在工作台面的中后部进行

所有工作应尽量在工作台面的中后部进行，并且应能通过玻璃观察挡板清晰看到。

这样做有两个目的：

• 便于操作者保持正确姿势

• 避免在柜口区域操作导致气流外泄

很多操作失误都发生在靠近柜口的位置，因此规范操作位置非常重要。

4. 不要频繁伸手进出

操作者不应反复将手臂伸出或移入柜内。
频繁动作会造成气流紊乱，影响气幕稳定，也容易把外界空气带入柜内。

应尽量在开始操作前就准备好所有物品，减少来回取放。

5. 尽量减少操作者身后的人员活动

生物安全柜不仅受柜内气流影响，也受柜外环境干扰。
操作者身后的人员频繁走动，可能扰乱周围气流，间接影响柜体性能。

因此，在进行关键操作时，应尽量减少无关人员流动。

五、哪些东西不能放进生物安全柜？

生物安全柜不是杂物台。
很多看似方便的东西，实际上都会影响气流和操作安全。

1. 不能使用本生灯

柜内不能使用本生灯。
原因是本生灯燃烧会产生热量，热空气上升会干扰柜内气流，破坏稳定性；同时，高温还可能损坏过滤器或影响柜体部件。

2. 尽量不使用明火

生物安全柜内不建议使用任何明火设备。
如确有必要，应优先考虑不产生明显热扰动的替代方式。

3. 不能让纸张、记录本、移液管等阻挡空气格栅

实验记录本、移液管、盒子、容器等物品如果放在空气格栅附近，会阻挡气流通道，造成局部紊乱。

这不仅可能导致：

• 样品污染

• 操作者暴露

• 柜内空气交换受阻

也会让原本合格的安全柜失去应有作用。

4. 建议优先使用一次性无菌接种环

在微生物接种操作中，最好使用一次性无菌接种环，既安全又方便，也能减少明火和反复灭菌过程对气流的影响。

六、操作过程中应养成的规范习惯

正确使用生物安全柜，除了遵守设备要求，还需要建立稳定的操作习惯。

1. 工作前提前准备

在开始操作前，先将所需试剂、耗材、培养基、标记工具等准备齐全，避免中途频繁进出柜体。

2. 操作动作要稳定、缓慢

避免大幅度、快速或突然的动作。
动作越剧烈，越容易扰动气流。

3. 保持台面整洁

柜内台面应保持简洁，做到“只留必要物品”。
操作完成后立即整理，避免积累杂物。

4. 不能在柜内进行文字工作

在生物安全柜内操作时，不要进行文字记录、填写表格等工作。
因为书写会占用操作空间，增加杂物，也可能影响气流组织。更合理的方式是在柜外完成记录整理。

七、使用结束后如何处理？

实验结束并不意味着工作结束。
正确的收尾步骤同样重要。

1. 继续运行风机至少5分钟

在安全柜内的工作开始前和结束后，安全柜的风机应至少运行5分钟。
这样有助于稳定气流、排出残留空气，并降低污染残留。

2. 对表面进行彻底擦拭消毒

工作完成后以及每天下班前，应使用适当的消毒剂擦拭生物安全柜表面。
包括：

• 台面

• 内壁

• 工作区常接触区域

• 可能污染的器具表面

消毒剂的选择应根据实验室的微生物类型、污染风险和设备材质确定。

3. 清理物品并恢复柜内整洁

将实验用品全部取出，废弃物按规范处理，确保柜体内部不残留杂物、废液或污染源。

八、使用生物安全柜时最容易忽视的几个误区

误区一：生物安全柜就是无菌操作台

不是。
生物安全柜的重点是生物防护，不等同于普通无菌工作台。两者用途和气流设计并不完全一样。

误区二：只要开着机器就安全

不是。
设备运行只是前提，操作规范才是关键。错误操作会大幅削弱保护效果。

误区三：柜内可以随意摆放物品

不是。
物品过多、过大、过高都会影响气流循环。

误区四：可以在柜内点火消毒

不是。
明火会干扰气流，还可能带来额外安全风险。

九、总结：规范使用，才能真正发挥生物安全柜的作用

生物安全柜是实验室安全体系中非常重要的一环，但它的作用不是“自动防护”，而是建立在正确使用、良好习惯和持续维护之上的。

真正安全的操作应做到：

• 使用前培训到位

• 设备运行正常再使用

• 操作时避免破坏气流

• 柜内不堆积杂物

• 不使用明火

• 工作后及时消毒与整理

对于微生物实验室而言，规范使用生物安全柜，不仅关系到实验结果的准确性，更关系到操作者自身、同事以及实验环境的安全。